文档介绍:葡萄酒中还原糖和总糖的测定
实验目的
掌握还原糖和总糖的测定的基本原理,学****费林试剂法测定还原糖和总糖的操作方法。
实验原理
还原糖和总糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或***基的糖类,单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,其中乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,对没有还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。
利用费林溶液与还原糖共沸,生成氧化亚铜沉淀的反应,以次***蓝为指示液,以样品或经水解后的样品滴定煮沸的费林溶液, 达到终点时, 稍微过量的还原糖将蓝色的次***蓝还原为无色,以示终点。根据样品消耗量求得总糖或还原糖的含量。
试剂和材料
盐酸溶液(1+1)。
氢氧化钠溶液:200 g/L。
标准葡萄糖溶液 g/L:精确称取 (称准至 )在 105~110℃烘箱内烘干3h并在干燥器中冷却的葡萄糖,用水溶解并定容至1000 mL。
次***蓝指示液 10g/L:***蓝,溶解于水中,稀释至 100mL。
费林溶液
费林溶液Ⅰ: 硫酸铜(CuSO4*5H2O),溶于水,稀释至500mL。
费林溶液Ⅱ:称取173g酒石酸钾钠和50g NaOH,溶于水,稀释至500mL。
使用时将溶液Ⅰ、Ⅱ按等体积混合。
四、实验步骤
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吸取费林溶液Ⅰ、Ⅱ各 mL 于 250 mL 三角瓶中,加 50 mL 水,摇匀,在电炉上加热至沸,在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定,当溶液的蓝色将消失呈红色时,加 2滴次***蓝指示液,继续滴至蓝色消失,记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。
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吸取费林溶液Ⅰ、Ⅱ各 mL于 250 mL三角瓶中,加 50 mL水和比预备试验少1mL的葡萄糖标准溶液,加热至沸,并保持2 min,加2滴次***蓝指示液,在沸腾状态下于1 min内用葡萄糖标准溶液滴至终点,记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。
F= m / 1000×V
式中: F——费林溶液Ⅰ、Ⅱ各5 mL相当于葡萄糖的克数,g;
m——称取葡萄糖的质量,g;
V——消耗葡萄糖标准溶液的总体积,mL。
测总糖用试样:
准确吸取一定量的样品(V1)于 100mL容量瓶中,使之所含总糖量为 ~ g,加5 mL盐酸溶液(1+1).加水至 20 mL,摇匀。于 68±1℃水浴上水解 15 min,取出,冷却。用 200 g/L 氢氧化钠溶液中和至中性,调温至 20℃,加水定容至刻度(V2)。
测还原糖用试样:
准