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01.
保证粪便新鲜,一般不超过24小时
02.
盛粪便的容器须干燥、洁净,无污染;
03.
容器外贴有标签,
04.
受检粪量一般为5~10g,或不少于30g,
05.
要严格按照粪检程序进行操作,以免漏检。
注意:
用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简便,连续作3次涂片,可提高检出率。
01
蠕虫卵检查:滴一滴生理盐水于洁净的载玻片,用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块,在生理盐水中涂抹均匀;涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。
02
直接涂片法
活滋养体检查:涂片应较薄,方法同查蠕虫卵。气温愈接近体温,滋养体的活动愈明显。必要时可用保温台保持温度。
01
包囊的碘液染色检查:直接涂片方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多,可用吸水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,取少许粪便在碘液中涂匀,再盖上盖片。涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体。
02
原虫检查
1
取约5mg(已用100目不锈钢筛除去粪渣)粪便,置于载玻片上,覆以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻压,使粪便铺开(20×25mm)。置于30~36℃温箱中约半小时或25℃约1小时。待粪膜稍干,即可镜检。
2
玻璃纸准备:将玻璃纸剪成22×30mm大小的小片,浸于甘油-孔雀绿溶液(含纯甘油100ml、水100ml和3%孔雀绿1ml的水溶液)中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现绿色。
3
使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。如粪膜厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则虫卵变形,也不易辨认。
厚涂片透明法(改良加藤法)
定量透明法
适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数。此法系应用改良聚苯乙烯作定量板,大小为40×30×,模孔为一长圆孔,大小为8×4mm,两端呈半圆形,。操作时将大小约4×4cm的100目尼龙网或金属筛网覆盖在粪便标本上,自筛网上用刮片刮取粪便,置定量板于载玻片上,用一手的两指压住定量板的两端,将刮片上的粪便填满模孔,刮去多余粪便。掀起定量板,载玻片上留下一个长形粪样,然后在粪条上覆盖含甘油-~,展平后加压,使玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经1~2小时粪便透明后置镜下计数。将所得虫卵数×24,再乘上述粪便性状系数,即为每克粪便虫卵数。
浮聚法:利用比重较大的液体,使原虫包囊或蠕虫卵上浮,集中于液体表面。常用的方法有两种:
01
饱和盐水浮聚法:此法用以检查钩虫卵效果最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯(,直径约2cm的圆形直筒瓶)中,加入少量饱和盐水调匀,再慢慢加入饱和盐水到液面略高于瓶口,但不溢出为止。此时在杯口覆盖一载玻片,静置15分钟后,将载玻片提起并迅速翻转,镜检 。
02
硫酸锌离心浮聚法:此法可用于检查原虫包囊,球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约1g,加10~15倍的水,充分搅碎,按离心沉淀法过滤,反复离心3~4次,至水清为止,最后倒去上液,(33%的溶液),调匀后再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处,离心1分钟。用金属环取表面的粪液置于载玻片上,加碘液一滴,镜检。
蔗糖离心浮聚法:此法适用于检查粪便中隐孢子虫的卵囊。取粪便约5g,加水15~20ml,以260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心5~10分钟,吸弃上清液,加蔗糖溶液(蔗糖500g,蒸馏水320ml,)再离心,然后如同饱和盐水浮聚法,取其表液膜镜检(高倍或油镜)。卵囊透明无色,囊壁光滑,内有一小暗点和发出淡黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大,常紧贴于盖片之下,但1小时后卵囊脱水变形不易辨认,故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖溶液。