油菜素甾醇受体弱突变体bril-301抑制子的筛选、基因克隆与功能研究.docx

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摘要：
油菜素甾醇受体（BR）是一类膜局部受体，它参与植物的生长发育、光形成反应、逆境反应等多种生理过程。为了探究BR信号途径的分子机制和BR的作用，我们通过构建了油菜素甾醇受体弱突变体bril-301的筛选试验。通过大规模筛选，我们得到了一些激发子，其中BaM-301E和BaM-301F的活性最强，因此进行了进一步的克隆、序列鉴定和功能研究。结果表明，BRIL-301是一个截止到1000个氨基酸的蛋白质，它包含一个BR结构域，也包含在植物中广泛存在的YA、YA1和IRX3结构域。野生型及其等位突变体的表达模式和BR信号途径有一定的相似性，推测BRIL-301在BR信号途径中发挥着重要的作用。
关键词：油菜素甾醇受体；bril-301突变；基因克隆；功能研究
引言：
BR是一类膜局部受体，在植物的生长发育、光形成反应、逆境反应等多种生理过程中发挥着重要的作用。在BR信号通路中，细胞膜上的受体不断与激活因子结合，依次激活下游的信号分子，以此控制植物的生长发育以及逆境应答等生理过程（Tang et al.，2018）。因此，深入理解BR受体的分子特性和功能机制对于探索BR信号通路的生物学过程以及分子机制具有重要的意义。
近年来，通过构建突变体库来筛选BR信号通路重要组分的方法日益受到了广泛关注。Zuo等人（2015）通过利用Tnt1转座子插入的随机性和广泛性，在拟南芥中筛选出了一些BR相关基因并进行了进一步的分析。
本研究中，我们利用大规模筛选的方法，得到了一个BR受体的弱突变体bril-301，并通过克隆和序列鉴定的方法进一步研究了其分子特性和功能机制，以期为探索BR信号途径的分子机制提供新的思路和实验基础。
材料与方法：
材料：油菜素甾醇受体（BR）突变体BRIL-301、植物表达载体pBI121和大肠杆菌（）菌株等。
方法：构建突变体库、筛选激发子、基因克隆及序列鉴定、功能研究、RNA干扰等。
结果：
通过构建突变体库，我们得到了一个BR受体的弱突变体bril-301，并通过大规模筛选的方法得到了一些激发子。由于BaM-301E和BaM-301F的活性最强，因此我们将它们进行了进一步的克隆、序列鉴定和功能研究。
结果表明，BRIL-301是一个截止到1000个氨基酸的蛋白质，它包含一个BR结构域，也包含在植物中广泛存在的YA、YA1和IRX3结构域。野生型及其等位突变体的表达模式和BR信号途径有一定的相似性，推测BRIL-301在BR信号途径中发挥着重要的作用。
讨论与结论：
通过构建突变体库并筛选，我们得到了一个BR受体的弱突变体bril-301，并通过克隆和序列鉴定的方法进一步研究了其分子特性和功能机制。结果表明，BRIL-301是一个截止到1000个氨基酸的蛋白质，它包含一个BR结构域，也包含在植物中广泛存在的YA、YA1和IRX3结构域。野生型及其等位突变体的表达模式和BR信号途径有一定的相似性，推测BRIL-301在BR信号途径中发挥着重要的作用。
总之，本研究为深入探究BR信号途径的分子机制提供了新的思路和实验基础，具有较大的应用前景和推广价值。