文档介绍：高效液相色谱法(HPLC)
及定性定量分析
提纲
一﹑HPLC系统简介
二﹑HPLC中的固定相和流动相
三﹑应用范围
四﹑定量定性分析
一、HPLC系统
HPLC系统
输
液
泵
进
样
器
色
谱
柱
检
测
器
数据
记录
及处
理
HPLC示意图
输液泵:
输液泵是HPLC系统中的重要部件之一,
泵的性能好坏直接影响到整个系统的质量和
分析结果的可靠性。
泵应具有的性质:
流量稳定;
流量范围宽;
输出压力高;
液缸容积小;
密封性能好,耐腐蚀。
输液泵
操作时的注意事项:
防止任何固体微粒进入泵;
流动相不含有任何腐蚀性物质;
工作时要注意溶剂瓶中的溶剂用完;
泵的工作压力不能大于规定的最大压力;
流动相要先进行脱气,防止产生气泡。
进样器:
目前采用较多的是六通
进样阀和自动进样器。
对进样装置的要求:
密封性好,死体积小,
重复性好,保证中心进样,
进样时对色谱系统的压力、
流量影响小。
进样方式可分为:
隔膜进样、停流进样、阀进
样、自动进样。目前应用做多的
是阀进样和自动进样。
进样器
色谱柱
色谱柱的要求:
柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料好多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难的分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30CM左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
检测器
检测器是HPLC系统的三大关键部件之一,作用是把洗脱液中的组分的量转化为电信号。HPLC的检测器要求是灵敏度高,噪音低,线性范围宽,重复性好,适用范围广等特点。
数据记录及处理
目前对于数据记录及处理所采用的是计算机,计算机的广泛应用使得HPLC操作更加迅速,简便,准确,精密和自动化,现在已经可以在互联网上远程处理数据,目前计算机在HPLC上的用途主要由:
采集处理和分析数据;
控制仪器;
色谱系统优化和专家系统。