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试验目得
掌握霉菌得观测法——小室观测法。
理解四种常见霉菌形态。
试验原理
1、霉菌
霉菌可产生复什分枝得菌丝体,分基内菌丝与气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其就是繁殖菌丝)及孢子得形态特征就是识别不一样种类霉菌得重要根据。霉菌菌丝与孢子得宽度一般比细菌与放线菌粗得多(约 3~10μm ),常就是细菌菌体宽度得几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观测。
2、观测措施
观测霉菌得形态有多种措施,常用得有直接制片观测法、载玻片培养观测法与玻璃培养观测法三种措施,本次试验采用载玻片培养观测法(小室培养法)。
3、载玻片培养观测法(小室培养法)
用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片与盖玻片之间得有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定期间后,将载玻片上得培养物置于显微镜下观测。这种措施既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观测不一样发育期得培养物。
试验器材
菌种:曲霉 ( Aspergillus sp、 ) ,青霉,根霉 ( Rhizopus sp、 ) , 毛霉( Mucor sp、 ),培养 7d 得马铃薯琼脂平板培养物
培养基:马铃薯培养基(简称PDA)(配方见附表)
仪器或其她用品:平皿,载玻片,盖玻片,无菌吸管,U 型玻棒,解剖刀,镊子,50%乙醇,20%甘油,显微镜,接种环,酒精灯等
试验内容
配置150ml得PDA(霉菌)培养基,然后高温灭菌。
培养小室得灭菌:在平皿皿底铺一张略不大于皿底得圆滤纸片,再放一U形玻棒,其上放一洁净载玻片与两块盖玻片,盖上皿盖,包扎后于110℃灭菌20~30分钟,烘干备用。
倒平板:取已灭菌得马铃薯琼脂培养基各6~7ml 注入另两个灭菌平皿中,使之凝固成薄层。
用解剖刀切培养基:在无菌操作得状况下,运用解剖刀将培养基切成
1cmx1cm得琼脂块,并将其移至上述培养室中得载玻片上(每片放两块 )。
在培养基边缘接种:通过无菌操作,用接种环从斜面培养物上挑取很少许得孢子,接种于培养小室中琼脂块得边缘上,用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。
培养:通过无菌操作,在培养小室中得圆滤纸上加 3ml 灭菌得20 %得甘油(用于保持平皿内得湿度 ) ,盖上皿盖,28 ℃ 正置培养一周。
镜检:取出载玻片置低倍镜下观测,必要时换高倍镜。
试验成果
试验绘图
四种霉菌:
A曲霉 B曲霉局部放大图
A青霉 B青霉局部放大图
毛霉 毛霉分析图
根霉:
根霉整体装片 根霉放大图
试验成果描述
菌种
曲霉
根霉
毛霉
青霉
形态特征
具有分隔;气生菌丝得一部分形成长而粗糙得分生孢子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成串得球形分生孢子。分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连。
菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝与假根。在假根得上方直立地生长出一至数根孢囊梗,其顶端膨大成球形孢子囊。囊得基部有囊托,中间有球形或半球形囊轴。
菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝得孢囊梗。各分枝顶端着生球形孢子囊,无囊托。
菌丝有横隔,分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙。基部无足细胞,顶端不形成膨大得顶囊,其分生孢子梗通过多次分枝,产生几轮对称或不对称得小梗,形如扫帚,称为帚状体。
试验成果分析及感悟
本次试验学会了霉菌得基本培养措施,对霉菌得形态特征也有了一定得理解,并学会了从形态上怎样辨别四种霉菌得措施。