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一〕 细胞DNA含量检测
细胞固定后用PI 〔Propidium iodide碘化丙啶〕,染色,因为PI特异性结合于细胞DNA,荧光强度与PI的结合量呈良好的线性关系,根据这个原理,可测出细胞的DNA含量。用于细胞周期、细胞倍体以及凋亡的检测。
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单参数直方图
图中2N代表G0/G1期细胞,4N代表G2/M期细胞,两者中间代表S期细胞。这是以2倍体和4倍体细胞为主的流式DNA图
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DNA细胞周期分析
细胞周期
G2
M
G0
G1
s
200
400
600
800
1000
G0
G1
s
G2
M
DNA分析
DNA含量
细胞数量
2N
4N
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2倍体
异倍体
4倍体
肿瘤组织中的各种DNA倍体
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含量与凋亡关系
DNA亚G1峰的检测:利用PI染色,检测具有亚G1期DNA含量的细胞比例,代表凋亡细胞数。
凋亡过程中,细胞内核酸酶的释放,将DNA降解,分解成小的片段,在标本制备中的固定处理时,细胞膜的完整性被破坏,使细胞内降解的DNA片段从细胞内流出,造成总体DNA含量减少,成为亚2倍体。
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