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摘要：
结肠癌是世界上常见的恶性肿瘤之一，其淋巴结和远处转移是其高死亡率的主要原因。去甲肾上腺素转运蛋白 (norepinephrine transporter, NET)是一种转运去甲肾上腺素的膜蛋白，研究表明其参与了很多种癌细胞的转移。本研究在人结肠癌细胞株SW480中探究了NET对其迁移能力的调控作用，研究结果显示，抑制NET的表达可以明显地抑制SW480细胞的迁移。
前言：
结肠癌是指恶性从结肠或直肠上皮发生的肿瘤。其罹患率和死亡人数在世界上都非常高。根据统计，结肠癌的发病率和死亡率均位居世界前列。结肠癌转移是其高死亡率的主要原因，因此，了解肿瘤细胞的转移机制对于预防和治疗结肠癌具有重要意义。
近年来的研究表明，去甲肾上腺素 (Norepinephrine, NE) 与多种肿瘤的发生和发展密切相关。去甲肾上腺素转运蛋白 (NET) 是负责转运NE的膜蛋白，在许多肿瘤中都发挥了一定的作用。然而，NET在人结肠癌的转移过程中的作用尚不明确。
本研究的目的是探究NET在人结肠癌细胞迁移中的作用及其机制。
材料和方法：
细胞培养：
人结肠癌细胞株 SW480 购自ATCC，细胞在DMEM培养基中（10%FBS）37°C、5％CO2的条件下维持生长。
siRNA转染：
siRNA是NET的小干扰RNA，siRNA转染剂是Lipofectamine 2000。将siRNA和转染剂混合后加入到SW480细胞中进行转染。重复实验，随机选择4个孔从中获取总RNA。
蛋白提取、分离、检测：
细胞集标本的总蛋白资料用SDS-PAGE制备样品gels，蛋白以TBST间接方法进行转移。膜切割后，膜被热力温黄针以及20毫米甲低霉素（pH ）和5%的不脂肪奶粉混合，在室温下进行1小时。用适当的抗体和次级抗体进行免疫印记。蛋白质密度由ImageJ软件确定。
迁移实验：
将SW480细胞种到装有transwell的钢网中，除了transwell的上层不加FBS，其它处理中都加10% 的FBS。迁移细胞在24 h内经过microtitreplater的下层，蓝色染料淋入通风量计中，检测OD值。重复实验，随机选择4个孔从中获取总RNA。
结果：
先对SW480细胞中NET的表达进行了检测，结果表明SW480细胞中NET的表达较高。
然后通过siRNA转染抑制NET的表达，Western blot结果表明，siRNA转染后，SW480细胞中NET的表达明显下降。
迁移实验结果表明，在抑制NET表达的情况下，SW480细胞的迁移明显受阻。
结论：
本研究旨在探究NET在人结肠癌细胞迁移中的作用及其可能机制。结果表明，抑制NET的表达可以降低 SW480细胞的迁移度。说明 NET参与了人结肠癌细胞的迁移过程。这为结肠癌的治疗和预防提供了新思路。需要进一步研究NET在人体中结肠癌的发生和发展中的作用以及其抑制机制。
参考文献：
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