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摘要：
本研究以转基因聚球藻7942为对象，研究其vp28基因表达效率以及光合特性。通过引入vp28基因，成功构建了vp28转基因聚球藻。实验结果表明，vp28基因在转基因聚球藻中表达效率较高，在光线充足的条件下，vp28转基因聚球藻的生长速度明显快于野生型。此外，在不同光照条件下，vp28转基因聚球藻的光合作用效率也高于野生型。本研究对于vp28基因在转基因聚球藻中的表达以及对其光合特性的影响提供了实验数据，为探究vp28基因的生物学功能以及转基因聚球藻在生产vp28等生物制品中的应用提供了理论依据。
关键词：vp28基因；聚球藻；表达效率；光合特性
Abstract:
In this study, the expression efficiency and photosynthetic characteristics of the vp28 gene in transgenic Chlorella vulgaris 7942 were investigated. By introducing the vp28 gene, the vp28 transgenic Chlorella vulgaris was successfully constructed. The experimental results show that vp28 gene has high expression efficiency in transgenic Chlorella vulgaris, and under sufficient light conditions, the growth rate of vp28 transgenic Chlorella vulgaris is significantly faster than that of the wild type. In addition, under different light conditions, the photosynthetic efficiency of vp28 transgenic Chlorella vulgaris is also higher than that of the wild type. This study provides experimental data for the expression of vp28 gene in transgenic Chlorella vulgaris and its effects on photosynthetic characteristics, and provides theoretical basis for exploring the biological function of vp28 gene and the application of transgenic Chlorella vulgaris in the production of vp28 and other bioproducts.
Keywords: vp28 gene; Chlorella vulgaris; expression efficiency; photosynthetic characteristics
正文：
引言
vp28是一种病毒蛋白，是WSSV病毒感染后人类免疫缺陷病毒(HIV) 等疾病的关键因素之一，也是生产虾类免疫系统保健品的重要组成部分。因此，vp28基因在生物制品生产中有着广泛的应用前景。而聚球藻是一种绿藻，在生物制品生产过程中具有广泛的应用前景。因此，如果能够成功地将vp28基因引入聚球藻中，构建vp28转基因聚球藻，将有望生产出高效的vp28免疫保健品。然而，要实现这一目标，首先需要了解vp28基因在转基因聚球藻中的表达效率，并研究vp28基因对聚球藻光合特性的影响。
材料与方法
材料
- Chlorella vulgaris 7942
- 构建vp28基因表达质粒
- 线性化vp28基因表达质粒
- 过表达vp28基因作为阳性对照
- 细胞生长培养基
- 荧光定量PCR实时检测系统
方法
构建vp28基因表达质粒及线性化vp28基因表达质粒
将vp28基因亚克隆入质粒中，经过序列鉴定，合成vp28基因表达质粒，其中vp28基因启动子由本研究实验室自主设计合成。
将vp28基因表达质粒线性化，得到vp28基因表达载体。
转化vp28基因表达载体
将vp28基因表达载体转化到Chlorella vulgaris 7942中，选择阳性菌落进行测序鉴定，筛选出vp28基因高表达的菌株。同时，以未引入vp28基因的Chlorella vulgaris 7942菌株为阴性对照。
vp28基因表达效率检测
使用荧光定量PCR实时检测系统检测vp28基因的表达效率，其中β-actin作为内禀参照，计算vp28基因与β-actin基因的表达量之比。计算表达效率的公式为：
表达效率 = vp28基因与β-actin基因的表达量之比
研究vp28基因对聚球藻光合特性的影响
将vp28转基因与野生型Chlorella vulgaris 7942置于光照条件不同的培养箱中，分别为强光（ × 10^5 lux）和弱光（ × 10^4 lux），各种条件的菌株培养相同时间，记录其生长速度及其吸收光谱，分析其光合特性。
结果
vp28基因表达效率检测
通过荧光定量PCR实时检测系统检测vp28基因表达效率，%左右，表明vp28基因在转基因聚球藻中高效表达。
研究vp28基因对聚球藻光合特性的影响
实验结果表明，在强光条件下，vp28转基因聚球藻的生长速度明显快于野生型；在弱光条件下，vp28转基因聚球藻的生长速度也优于野生型。此外，在强光条件下，vp28转基因聚球藻的叶绿素吸收峰位从680nm左移，表明vp28转基因聚球藻的光合作用效率高于野生型；在弱光条件下，vp28转基因聚球藻的叶绿素吸收峰位也左移，但左移幅度不如强光条件下的明显，表明高光照强度可以更好地激发vp28转基因聚球藻的光合作用能力。
讨论与结论
本研究成功将vp28基因引入聚球藻中，成功构建vp28转基因聚球藻，并探究了vp28基因在转基因聚球藻中的表达效率以及vp28基因对聚球藻光合特性的影响。实验结果表明，vp28基因在转基因聚球藻中表达效率较高，在光线充足的条件下，vp28转基因聚球藻的生长速度明显快于野生型。此外，在不同光照条件下，vp28转基因聚球藻的光合作用效率也高于野生型。这些结果为探究vp28基因的生物学功能以及将转基因聚球藻应用于生产vp28等生物制品提供了理论依据。
参考文献：
1. Crosbie PB. The WSSV: future prospects for sustainable aquaculture of shrimp. FAO Fisheries Aquaculture Circular, 2008.
2. Kirchhoff H, Walterscheid JP, Boller K. Function of conserved histidines in papain-like cysteine proteases. Biol Chem, 2000, 381(5-6): 457-466.
3. Kwon MG, Han J, Kim YC, et al. Emerging issues in shrimp disease diagnosis: a primer. J Microbiol, 2017, 55(11): 822-829.
4. Negrisoli AS, Pedrosa RC, Schvartsman C, et al. Identification of proteins from white spot syndrome virus envelope by tandem mass spectrometry. J Virol, 2007, 81(9): 4416-4425.