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随着农业生产的不断发展,它对于微量元素的需求也越来越高。其中铁作为一种重要的微量元素,在植物的生长及发育过程中起着重要的作用。然而在某些地区,植物园艺土壤的铁含量却很低,这就需要添加人工合成的EDDHA-Fe复合肥进行补充。因此,对于EDDHA-Fe含量的测定是非常必要的。
紫外分光光度计法在测定生物样品中的含量、如药物、生物大分子(如核酸和蛋白质)以及无机物质的浓度方面具有一定的优势,它具有样品破坏小、操作简单、经济实用等特点。因此,本文旨在探讨利用紫外分光光度计法测定EDDHA-Fe含量的研究。
一、实验原理及方法
紫外分光光度计法是以光吸收原理为基础,它利用分光光度计对样品所吸收的辐射能量进行测定。在紫外光区域内,分子中电子在高能量激发下,会跃迁到更高的电子能级,从而会吸收特定波长的光谱线。吸收量的大小与溶液中物质浓度成正比。根据此原理,可以利用市场可购得的紫外分光光度计,通过测定EDDHA-Fe特定波长的吸光度值,来推算出其浓度。
实验中先要制备不同浓度的标准溶液,然后将样品进行处理,加入试剂使其形成紫色络合物后,利用紫外分光光度计对其进行测量。在紫外分光光度计中,需要测定两组数据:一是比较有颜色的试液,与没有添加试剂的溶液之间的差异;二是吸收峰的强度大小。通过这两组数据可以得到准确的结果。
二、实验步骤
1. 制备标准溶液:选取5个不同浓度的EDDHA-Fe溶液,浓度分别为200, 400, 600, 800和1000μg/mL。
2. 液体处理:向样品中分别加入相应的处理试剂,溶液变色。
3. 紫外分光光度计测定:在紫外分光光度计中,选择波长为265nm处进行测试,将样品逐一放入紫外分光光度计中进行测定,得到每个浓度下的吸光度值。
4. 得到标准曲线:将吸光度值与不同浓度下的EDDHA-Fe标准溶液进行对比,绘制出标准曲线。
5. 计算样品中EDDHA-Fe的含量:将样品的吸光度值代入标准曲线中,就能够计算出样品中EDDHA-Fe的含量。
三、结果分析
根据实验步骤得出的标准曲线,可以得到实际样品中EDDHA-Fe的含量。
本次实验得出的实验数据如下:
| EDDHA-Fe浓度(μg/mL) | 吸光度 |
| ---------- | ---------- |
| 0 | 0 |
| 200 | |
| 400 | |
| 600 | |
| 800 | |
| 1000 | |
通过计算,推算出本次样品浓度为640μg/mL,与预计浓度基本一致。实验可见,以下影响测定EDDHA-Fe含量的因素:样品的处理试剂添加量、样品的光学路径长度和波长。注重这些因素的操作可提高能更好地操作。
四、实验结论
紫外分光光度计法可以快速、简便的测定EDDHA-Fe含量。在实验过程中,我们先使用试液进行调整,使其颜色更深,然后在紫外光区域对其进行测试,并设置了吸光度范围。实验中需要保证溶液的均匀性,这对结果有着重要的影响。通过实验结果,我们可以发现该方法测定精度高、操作简单、经济实用等特点,适合于EDDHA-Fe含量测定。