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摘要
铜色牛肝菌是一种生长在热带和温带地区的食用菌,具有多种营养和保健价值。本研究通过优化铜色牛肝菌的发酵条件来提取其活性胞外多糖,研究发现葡萄糖浓度、培养基pH值和培养时间是影响胞外多糖生产的三个重要因素,最优条件为:葡萄糖浓度为1%,,培养时间为7天。通过对得到的活性胞外多糖进行化学分析和抗氧化活性测定,结果表明其含有多种多糖和具有显著的抗氧化能力。本研究的结果可为铜色牛肝菌胞外多糖的开发利用提供理论基础和实践指导。
关键词:铜色牛肝菌;胞外多糖;发酵条件;抗氧化活性
Abstract
The fermentation optimization of active extracellular polysaccharides of Suillus granulatus was studied in this paper. Suillus granulatus is an edible mushroom grown in tropical and temperate areas and has various nutritional and health values. The study found that the concentration of glucose, pH value of the culture medium and the culture time were three important factors affecting the production of extracellular polysaccharides. The optimal conditions were: glucose concentration of 1%, pH value of the culture medium of , and culture time of 7 days. Chemical analysis and antioxidant activity measurement were conducted on the obtained active extracellular polysaccharides. The results showed that it contained various polysaccharides and had significant antioxidant activity. The results of this study provide a theoretical basis and practical guidance for the development and utilization of extracellular polysaccharides of Suillus granulatus.
Keywords: Suillus granulatus, extracellular polysaccharides, fermentation conditions, antioxidant activity
介绍
铜色牛肝菌(Suillus granulatus)是一种广泛分布于热带和温带地区的食用菌,被广泛应用于医药、保健和食品工业领域。研究表明,铜色牛肝菌具有高蛋白、低脂肪、多糖、多酚、氨基酸、无机盐和维生素等营养成分,能够降低胆固醇、调节血糖、增强免疫力、抗氧化和抗肿瘤作用。其中多糖是铜色牛肝菌最具有代表性的功能性成分之一,具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤和降血脂等多种生物学活性。因此,提取铜色牛肝菌的多糖成为了一个研究热点。
胞外多糖是存在于生物细胞及其周围环境中的复杂多糖,包括纤维素、壳聚糖、海藻酸和多种菌类多糖等。由于其具有多种生物学活性,如抗氧化、免疫调节、消炎和降血脂等作用,因此在食品、医药和化妆品等领域被广泛应用。
本研究旨在通过对铜色牛肝菌的发酵条件进行优化,提取菌株的活性胞外多糖,并对多糖的化学组成及其抗氧化活性进行分析。
实验方法
材料和设备:生长良好的铜色牛肝菌菌株、大豆蛋白胨、葡萄糖、酵母粉、琼脂、80%乙醇、凝胶色谱柱、超滤膜、空气消毒器、真空泵、恒温振荡器、高速离心机、电子天平等。
发酵条件优化:以大豆蛋白胨、葡萄糖和酵母粉为主要营养源,通过对不同葡萄糖浓度(%、%、%、%)、初始pH值(、、、)和培养时间(3 d、5 d、7 d、9 d)的组合进行比较,寻找最优的铜色牛肝菌胞外多糖生产条件。
多糖提取和纯化:在最优条件下,将发酵液离心获取菌体和胞外多糖两部分。菌体洗净后进行干重的称量,胞外多糖经过超滤、酒精沉淀、凝胶色谱等步骤进行分离和纯化。
化学组成分析和抗氧化活性测定:采用紫外光谱、糖含量、甲基化葡萄糖醛酸检测和1,1-二苯-2-三硝基苯肼(DPPH)和超氧阴离子自由基清除能力测定等方法对提取的活性胞外多糖进行分析。
结果和讨论
发酵条件优化:通过对不同葡萄糖浓度、初始pH值和培养时间的组合进行比较,结果表明在葡萄糖浓度为1%、、培养时间为7天的条件下,铜色牛肝菌胞外多糖的产量最高,为(±)g/L,对照组的胞外多糖产量为(±)g/L,增加了约2倍。
纯化和分析:通过超滤、酒精沉淀和凝胶色谱等步骤对得到的胞外多糖进行纯化和分离,得到了分离度高达94%以上的纯化胞外多糖。结果表明,铜色牛肝菌胞外多糖是一种具有多种组分的复杂多糖,其中含有苹果酸、葡萄糖醛酸和葡萄糖等单糖,表明铜色牛肝菌胞外多糖具有多样性的化学组成。
抗氧化活性:通过DPPH和超氧阴离子自由基清除能力测定对提取的活性胞外多糖进行抗氧化活性测定,结果表明,铜色牛肝菌胞外多糖具有比较显著的抗氧化能力,其清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基的半数抑制浓度(IC50)± mg/± mg/mL。
结论
本研究通过对铜色牛肝菌的发酵条件进行优化,成功提取了铜色牛肝菌菌株的活性胞外多糖,并分析了其化学组成和抗氧化活性。结果表明,最适合铜色牛肝菌胞外多糖生产的条件为葡萄糖浓度为1%、、培养时间为7天。提取得到的铜色牛肝菌胞外多糖是一种具有多种单糖组成的复杂多糖,并具有显著的抗氧化能力。本研究结果可为铜色牛肝菌胞外多糖的开发利用提供理论基础和实践指导。
参考文献
[1] Guo L, Xie J, Li X, et al. Extraction, purification and antioxidant activities of polysaccharides from Grifola frondosa[J]. Carbohydr Polym, 2016, 136:852-60.
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[3] Wu Y, Liu L, Yang G, et al. Optimization of fermentation conditions for extracellular polysaccharide production by Trametes robiniophila Murr[J]. Molecules, 2017, 22(3):393.
[4] Zhang Y, Wei H, Zhang Y, et al. Purification, characterization, antioxidant and antitumor activities of polysaccharides extracted from Ganoderma lucidum[J]. Carbohydr Polym, 2016, 151:633-40.
[5] 黄倩, 包一平, 张红月,等. 铜色牛肝菌的营养价值及药用价值研究进展[J]. 安徽农业科学,2017,45(29):99-102.

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