文档介绍：土鳖虫提取液对人胃低分化腺癌细胞BGC论文
邹玺, 刘宝瑞, 钱晓萍, 禹立霞
【关键词】土鳖虫;,,.freelan Gastric Loa Cell Line BGC-823 in vitro
Abstract:ObjectiveTo investigate antineoplasmic activity of extract of eupolyphaga on human gastric loa cell line BGC823 in MTT assay has been developed for quantitative evaluation of the proliferation of BGC823 of an gastric loa cell line BGC823 in vitro, but ethanol extract of eupolyphaga has significant effect. The cytotoxic effect is the maximum at 48 hours and have a dosedependent relation. hanol extract of eupolyphaga has cytotoxic effect in vitro, echanism of cytotoxic effect.
Key ic activity
《中国药典》收载土鳖虫正品药材为鳖蠊科昆虫地鳖Eupolyphaga sinensis I1640完全培养液中,37℃恒温,5%CO2,饱和湿度培养箱中生长。取对数生长期细胞用于实验。土鳖虫:购自六安市国泰药业有限责任公司,批号:20041201试剂:RPMI1640培养液(GIBCO公司产品);MTT(sigma公司产品,以超纯水配制成5 mg/ml浓度);二***亚砜(DMSO,上海凌峰公司产品,分析纯)。
药物制备
水提物的制备称取药材100 g,以水为溶媒提取两次。第1次加10倍量水,加热提取1 h,滤过;药渣加8倍量水,加热提取1 h,滤过。合并两次滤液,浓缩至1 g/ml(相当于生药),定容。 μm微孔滤膜过滤,备用。
醇提物的制备称取药材300 g,以95%乙醇为溶媒提取两次。第1次加8倍量溶媒,加热提取1 h,滤过;药渣加8倍量溶媒,加热提取1 h,滤过。合并两次滤液,浓缩至1 g/ml(相当于生药),定容。 μm微孔滤膜过滤,备用。
配药将上药用完全培养液稀释后得4种终浓度:10,5 ,, mg/ml供实验用。将醇提液原液以完全培养液稀释为8, ,6,5 ,4 ,3 ,2,1 mg/ml供实验用。以上药物均实验前新鲜配用。
方法与步骤
采用四***偶氮唑蓝(MTT)显色法[1,2]在含10%胎牛血清的1640培养液中培养细胞,在细胞达到指数增长期时用于实验。×104/ml,接种于无菌的96孔培养板中。每孔加入肿瘤细胞悬液200 μl,培养24 h后吸去原有的培养液,分别加入各200
μl的4种不同浓度土鳖虫醇提液和6种不同浓度水提液,设空白对照孔加