文档介绍：山东大学
硕士学位论文
根癌农杆菌介导的小麦抗白粉病基因转化及小麦小孢子培养研
究
姓名:秦余香
申请学位级别:硕士
专业:发育生物学
指导教师:夏光敏
20040515
论文作者签名:盔金盔论文作者签名:羞金鱼导师签名:霪当拯日期:型女幺盘心原创性声明关于学位论文使用授权的声明日期:型牦本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论
根癌农杆菌介导的小麦抗白粉病基因转化及小麦小孢子培养研究中文摘要小麦是我国和世界上重要的粮食作物之一,而病虫害严重影响着其产量,因此培育高产、抗病的小麦新品种具有重要意义。而传统培育小麦新品种的方法具术向小麦转入抗病基因具有重要的理论意义和应用价值。实验一以小麦愈伤组织为受体,利用农杆菌菌株将大麦匆寤虻入不同基因型小麦:核生拧⒀锫、烟优4雍松号和扬麦街基因型小麦获得棵转基因植株,,外源基因已整合到小麦基因组并遗传给后代。实验结果表明,筛选压力的存在对转基因植株的获得至关重要,在无筛选压力下未获得转基因植株。米;蛑仓暌圃源筇锖笳=崾怠=;蛑仓曛种苍谖率液痛筇镏校白粉病发作时期分析其抗病性,结果表明,部分转基因植株具有明显的白粉病抗拧⒀逃、济南只蛐托÷笥酌纾コ缍耍冻錾さ悖左右的农杆菌菌液浸染,从三种基因型小麦,都得到了转基因植株,转化频率分别为%,.%,%。实验表明,苗端转化法能大大提高转化率,是一种有效的小麦遗传转化方法。实验三进行了小麦小孢子培养的初步研究。小孢子培养是在花粉培养的基础上发展起来的新技术。因小孢子是单细胞且能再生纯合植株,因此,通过对转基因植物的小孢子进行培养,可以快速获得纯合体,使转基因品系尽快应用于生产。本实验掌握了适于小麦小孢子培养的花粉发育时期,找到了小孢子预处理的适宜条件,得到了体细胞胚。关键词:小麦,根癌农杆菌,遗传转化,愈伤组织,苗端,大麦膨口反义基因,小孢子培养有历时长、效率低、目的性差等缺点,所以采用新兴生物技术特别是基因工程技性。实验二采用了以小麦苗端为受体的农杆菌转化方法。选择长至的核生山东大学硕士学位论文
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符号说明坐至奎兰堡主兰堡堡奎乙酰辅酶然乙酰丁香酮溴化乙锭十二烷基磺酸钠卉谢偕み十六烷基三甲基溴化胺一二氯苯氧乙酸葡萄糖苷酸霍茄趟吲哚乙酸激动素培养基胭脂碱合成酶新霉素磷酸转移酶聚合酶链式反应白粉病肿瘤诱导三羟基氨基甲烷ぁ反义乙二胺四乙酸吲哚丁酸卡那霉素萘乙酸苯乙酸巴隆霉素一籅—籨.。產··,
前言基因转化系统。根瘤农杆菌中含有肿瘤诱导质粒蹋琻质粒上含有可转移一:根癌农杆菌介导的小麦遗传转化变育种等方法增加变异类型等。但传统的育种方法存在着育种周期长,育种效率小麦是世界上分布最广,种植面积最大的粮食作物之一。我国是小麦的传统种植国,种植面积达四亿亩。但不利的自然条件,例严重的病虫害和干旱等题,严重影响我不断提高,对小麦的产量和品质也提出了更高的要求。入世以来,我国小麦市场又面临激烈的国际竞争。因此培育耐盐、抗旱,抗虫、抗病、优质的小麦新品种成为我们的重要任务,是关系我国几亿农民生产、生活和十几亿人民吃饭的大事。小麦传统的育种方法主要是利用种间杂交来培育新品种,采用远添杂交和诱低,预见性差,要经过多代选择等缺点。且有计划的常规育种使得小麦品种遗传变异范围越来越窄朴婪宓龋。因此单纯的常规育种方法已不能满足现代育种的要求。加强种子资源韵创新研究,拓宽小麦遗传变异的范围,培育出适应不同目标的小麦新品种,成为广大育种工作者的新课题。现代生物技术,特别是转基因技术的快速发展,可以打破科、属、种的界限向生物导入外源隋新霞等,庑┘际跷4秤止ぷ魑侍獾慕饩鎏峁┝巳碌姆椒ǎ岣吡艘为加快转基因植株的纯合,使转基因植株尽快应用子生产,进行转基因植株的小孢子培养是一种理想的选择。小孢子培养是指在体外条件下,由雄配子体直接发育成完整植株的过程。小麦的小孢子培养是在花药培养的基础上发展起来的新技术。但它又区别于花药培养,前者属于单细胞培养,后者属于器官培养的范本论文研