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培养基的配制与简化——植物组织培养技术(Ⅱ).docx

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培养基的配制与简化——植物组织培养技术(Ⅱ).docx

上传人:wz_198613 2025/3/31 文件大小:11 KB

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植物组织培养技术是通过人工组织培养的方式,使植物细胞或组织在人工培养基内生长,分化,重建其结构或产生新的植物体系的一种方法。培养基作为植物组织培养的基础,是植物组织培养领域中不可或缺的一环。但是,传统的成分复杂和配制繁琐的培养基,造成了不少的问题,如:成本高,容易出现变质、降解、污染等问题,同时也影响着其应用与发展。因此,在培养基的配制与简化方面开展相关研究具有十分重要的现实意义。
1. 原培养基的组成与影响
传统的植物组织培养的培养基是Murashige和Skoog(简称MS)培养基。这种培养基通过对十二种无机元素、二十三种氨基酸、六种维生素以及3%蔗糖的精细配比而成。
无机元素的含量是植物培养基的主要成分,其中锌是重要的微量元素。氨基酸的作用是供给细胞合成蛋白质所需要的氨基酸,从而促进细胞分裂和生长。维生素则可分为可溶于脂质的和可溶于水的两类,水溶性的维生素对植物生长起到了很重要的作用。而蔗糖作为植物所必需的糖分可被植物吸收利用。
然而,MS培养基的制备过程繁琐,成本较高,所含的绩效成分和代谢物也不尽相同。 培养基的复杂成分往往会影响植物发育的节律,导致植物生长周期长、不稳定、易转化不良等问题。因此,有必要进行培养基的简化。
2. 培养基简化的策略
培养基简化的策略是在保留基本的无机元素、蔗糖和指定的激素和维生素成分的基础上,去除多余的成分,或减少成分的种类和浓度,从而实现更加简单的配方和更多的经济性。
成分去除法
成分去除法是最常用的培养基简化方法,对于已知的培养组分可以逐一去除,测试植株生长或发育的变化,选择最少的基础成分。
例如,Quartacci和 Navari-Izzo使用了NVMT培养基,NVMT培养基将NO3-, K+,Mg2+,Fe3+和micro 25倍储存液中必需的10种胺类合成物在肌酸钠缓冲溶液的基础上组成。 这个培养基最初包含的Cu2+,Ni2+和Mn2+是被去除的。
组合成份法
组合成份法通过改变成分的组合比例,减少了培养基的组份种类和整体成本,而对植物生长发育的影响较小。此时,选择种类和浓度较为单一的元素,并将它们与其他合适的元素一起混合。
例:Mohammadzadeh对B5和MS培养基进行比较,分析表明,B5和MS的植物生理效应不同。 因此,作者组合了两种培养基的成分,其中MS含有主要的无机成分,B5含有多种有机成分,即使减少浓度,依旧促进了甜菜糖或其它作物的诱导培养。
单一元素稀释法
如CuSO4,MnSO4,K2HPO4和NH4NO3等经常用于植物培养的培养基成分,它们的稀释或去除对于植物的影响非常小。采用单一元素稀释法可以减少进入培养基的化学成分和成本,同时保持植物生长和发育所需的最基本元素。
例:Azizi和 colleagues以ZnSO 4为例,使用稀释的方法来优化培养基的组成,使其更经济,更适合茄子、麦类等植物培养。结果表明,ZnSO4的精简方案在叶绿素和叶子过氧化物酶活性方面优于未被稀释的原方案。
3. 简化培养基的发展前景
随着植物组织培养技术的高速发展,越来越多的科学家开始考虑如何简化培养基的组成,从而使其更经济、简单、安全、易于管理。 实现培养基的简化可以在减少成本和降低污染的同时提高培养的效率和质量。习惯性的配方TCM、MS、B5等为代表的复杂配方也开始被逐渐淘汰,更加灵活的配方逐渐进入人们的视野。因此,未来尽可能考虑新的培养基简化方案的探索与应用有助于推动植物组织培养技术的发展。

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