文档介绍：综合实验报告书
(2011 ~2012学年)
实验题目大肠杆菌抗药性突变株的分离
学院名称生物与食品工程学院
专业(班级) 生物技术09-1班
姓名(学号) 李顺 20096224
起讫日期 -
指导教师李军红
2011年 12 月 30 日
大肠杆菌抗药性突变株的分离
摘要: 以实验室大肠杆菌为出发菌株, 采用梯度平板法, 利用链霉素, 尝试了对经紫外线诱变的菌株进行耐药性菌株的分离及抗性水平的确定。诱变前的大肠杆菌对链霉素有一定的抗性,。经过紫外诱变后,大肠杆菌对链霉素的抗药性增强,实验未能分离出纯种的抗性菌株。
关键词:大肠杆菌分离抗药性梯度平板法
Abstrack : By the laboratory e. coli strains for starting, gradient plate method, using streptomycin, try to the strains of ultraviolet mutagenesis resistance strains on the separation and determination of the resistance level. Mutation of e. coli before to streptomycin have certain resistance,. After uv mutagenesis, escherichia coli to streptomycin resistance to strengthen, the experiment failed to separate out of the pedigree of the resistant strains.
Key words : escherichia coli isolation drug- resistance Gradient plate method
前言:本实验学****用梯度平板法分离抗药性突变株。实验基本原理是基因中碱基顺序的改变可导致微生物细胞的遗传变异。这种变异有时能使细胞在有害的环境中存活下来,抗药性突变就是一个例子。微生物的抗药性突变是DNA的某一特定位置的结构改变所致,与药物的存在无关,某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段,而不是作为诱发突变的诱导物。因而在含有一定浓度抑制物药物的平板上涂布大量的细胞群体,极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化,进一步进行抗性实验,就可以得到所需要的抗药性菌株。抗药性突变常用作遗传标记,因而掌握分离抗药性突变株的方法是十分必要的。为了便于选择适当的药物浓度,分离抗药性突变株常用梯度平板法。本实验拟采用梯度平板法分离大肠杆菌抗链霉素突变株。制备梯度平板的方法是:先倒入不含药物的底层培养基,把培养平板斜放,凝固后将平板平放,再倒入含有链霉素的上层培养基,这样便可得到链霉素浓度从一边到另一边逐渐降低的梯度平板。在此平板上涂布大量敏感菌,经过培养后,在链霉素浓度比较高的部位长出的菌落中可分离到抗链霉素突变株。
材料和方法
材料
菌种大肠杆菌,由微生物综合实验室提供。
培养基和试剂 LB培养基,生理盐水,无菌水,链霉素。
方法
菌体培养:接