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结核病痰涂片检查及质量保证
一、痰涂片检查
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结核病细菌学检查要有独立的实验室,不得与其他实验室混用,最好为P3级实验室;
培养基制备、洗刷等相对洁净的操作与涂片镜检、培养前处理、药敏试验等污染操作要有独立分开的场所,最好分别在专用的房间进行;
(一)结核病细菌实验室布局原则
基层只从事涂片镜检的实验室只拥有一间独立房舍的情况下,相对洁净区(镜检区、登记区)与污染区(涂片、染色区)要有明显区分。
干酪痰、血痰或粘液痰为合格标本,量应为3-5毫升。
难以获得合格标本时,也应进行细菌学检查,但应注明标本性状,以供分析结果时参考。
收集标本的容器应采用国家参比室推荐的标准痰瓶,或采用直径4厘米、高2厘米的广口塑料(或蜡纸)的或密闭容器。
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(二)痰标本的收集和运送
容器上应注明与检验单一致的病人姓名、编号及日期。
需送上一级实验室检查的痰标本应置4℃冰箱保存,外送前认真核对检验单与痰瓶上标注,放专用的冰盒内运送,或用纸袋、塑料袋封扎牢后顺序放入包装盒,盒外注明请勿倒置标志。
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直接涂片法操作流程:
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涂痰膜(大小10×20㎜),自然干燥
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复红加热初染5分钟
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流水冲洗
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盐酸酒精脱色3分钟(必要时重复脱色,但不要过度)
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流水冲洗
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美兰复染30秒
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流水冲洗
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自然干燥,镜检
(三)痰涂片操作流程及显微镜检报告方式
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显微镜检报告方式:
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0条/300视野:萋-尼氏抗酸杆菌阴性
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1-8条/300视野:实报菌数并重检
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3-9条/100视野:萋-尼氏抗酸杆菌阳性(+)
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1-9条/10视野:萋-尼氏抗酸杆菌阳性(2+)
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1-9条/1视野:萋-尼氏抗酸杆菌阳性(3+)
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≥ 10条/1视野:萋-尼氏抗酸杆菌阳性(4+)
选择痰标本中脓性、血样、干酪样的部分涂片阳性率较高;
打开痰盒、涂抹痰膜、烧灼接种环时容易产生气溶胶,应注意正确操作和自身防护;
一张玻片只涂一份标本,玻片一次性使用,防止交叉污染;
石炭酸复红初染时必须加温。
(四)细菌学常规检查的注意事项
常见误差原因见下表
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