文档介绍：±邀生塑堂生金抖堂堂喧究廑欣昀邀生物运焦堂研生:指导教师:合作指导教师:申请学位门类级别:专业称:方向:所在学院:答辩委员会主席:二零零七年六月��������������������名凼酆单位代码:��分类号:号:瑟缴:
摘要的妇、��烬·��腅�对螺旋藻有完全的致死作用;固体培养条件下,��/�·��本文对螺旋藻遗传转化操作的方法进行了初步的研究。探索螺旋藻对不同抗生素的耐受性和敏感性;对比不同实验方法提取螺旋藻基因组���呕疌��椒ㄌ�取出高质量螺旋藻基因组��谎芯柯菪�宥缘抖拱彼���拿舾行裕�月菪��抗�突变株��幕�蜃镈�转化野生藻株�,获得了转化螺旋藻的参数组合;成功利用外源质粒载体���;�菪�澹�迪致躺�ü獾鞍譍�在螺旋藻细胞内的稳定表达。本研究初步建立了一套螺旋藻遗传转化操作系统,为螺旋藻转基因技术提供了重要参考。超声波预处理对螺旋藻单细胞体系的制备有很好的促进作用。超声波作用螺旋藻藻丝��螅�逅慷纹骄�赴���.�,单细胞比例达到�.�ィ�以偕�芰�虾茫�可适用于遗传转化的操作。螺旋藻对����和���苊舾校�禾迮嘌�跫�拢�.�穏·��腃�、�癵.�以的���岭·�。的���.�搿��暗腅�可完全抑制螺旋藻在固体平板上的生长。螺旋藻对��衔C舾校�禾迮嘌�盇�对螺旋藻的�����·�~,固体培养时��月菪�宓腗�约为�����āB菪�宥訩�很不敏感,�����的�对螺旋藻的生长不能产生任何抑制作用。����、��虯�均适合作为螺旋藻的抗性筛选标记,筛选浓度分别为:����·�一、�搿��弧�.��·��、��癵·“~。本实验获得��优化方法作为提取螺旋藻基因组��淖罴逊椒ā1痉椒ǘ�螺旋藻材料进行冻融和超声波破碎,结合高浓度的溶菌酶处理细胞,以��作为提取缓冲液,加入��匣�掖己偷鞍酌窴,两次酚仿抽提蛋白质、色素和多糖类物质。通过��优化提取方法提取的螺旋藻基因组��拇慷冉细撸琌��/���滴������笮≡嘉����芄宦�愫笮�笛榈男枰!�将螺旋藻抗�突变株��幕�蜃镈�作为材料转化野生藻株,以�“���的�作为筛选压力,获得了�曜;�逯辍W;�笆芴宓ハ赴�逑档拇�矸绞饺缦拢�采取在低于最适生长温度的条件下���培养螺旋藻,转化前用���·�暗腅��预处理�������β实某��ǘ月菪�褰�写���;采用自然转化方法,光暗条件液体培养后涂平板,筛选转化子。以携带昱勿基因的质粒���魑T靥澹�捎猛�碊�转化确定的技术参数转化螺旋藻�藻株,以������腁�为选择压力,获得了�株抗性藻株。对转化藻株进行荧光检测,有�株藻株在���贤饧し⒐庠聪路⒊雎躺�ü猓�な礸勿基因在转化藻株中得到有效表达。连续观察转化藻株荧光发光情况发现,转化藻株转
关键词:钝顶螺旋藻,抗生素,基因缍�瓺�,转化,盛章基因,绿色荧光接�魏缶�晒鄄斓铰躺�ü猓�な盗耸癜谆�虺晒κ迪至嗽诼菪�逑赴�诘奈榷ū�达。�
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本文常用英文缩写词��������中文全称氨苄青霉素***霉素乙酰转移酶***霉素十六烷基三***溴化铵绿色荧光蛋白��咸烟撬彳彰�千碱基对卡那霉素最低抑制浓度聚合酶链反应十二烷基磺酸钠链霉素醋酸电泳缓冲液�缓冲液缩写词英文全称刀豆氨酸红霉素光密度核糖核酸酶�����������������������������������
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