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(优选)细胞产物分析技术细胞产物分离方法
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经典分离方法——液-液萃取法
利用组分在两个互不相溶的液相中的溶解度差异而将其从一个液相转移到另一个液相的分离过程称为液液萃取,也叫溶剂萃取,简称萃取。
待分离的一相称为被萃相,萃取后成为萃余相,用做分离剂的相
称为萃取相。
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经典分离方法——液-液萃取法
被萃取组分在萃取相中的溶解度要大于被萃取相。
一般一相为水相,一相为有机相。在水相中增加盐离子浓度可以降低有机相在水中的溶解度。
萃取应采用少量多次原则。
从水相中萃取有机物质时,单级萃取时一般选择该物质的最佳溶剂。多级萃取溶剂选择一般从弱极性→强极性。
密度:石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丁醇、苯<水<二氯甲烷、氯仿
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经典分离方法——液-液萃取法
用一种强极性溶剂直接提取后再用极性不同的溶剂与强极性溶剂的提取液进行液/液两相梯度萃取
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经典分离方法——液相微萃取法
根据液滴状态的不同可分为单滴液相微萃取( SD-LPME) 和中空纤维液相微萃取(HF-LPME) ;
根据悬挂液滴位置的不同可以分为直接液相微萃取(D-LPME) 和顶空液相微萃取(HS-LPME) ;
根据操作方式的不同可以分为静态液相微萃取( S-LPME) 、动态液相微萃取(D-LPME) 和连续流动液相微萃取(CFME) ;
根据作用相的多少可分为两相液相微萃取和三相液相微萃取(LLLME )
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经典分离方法——液相微萃取法
单滴液相微萃取( SD-LPME)是将萃取用的有机溶剂液滴悬挂在微量进样器的针端。同液-液萃取一样,单滴液相微萃取也是基于分析物在不同相中分配系数不同而达到萃取的目的。有机相液滴体积一般为1-5微升,远远小于样品体积,所以可以达到对待测物的富集。
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经典分离方法——液相微萃取法
直接液相微萃取:萃取溶剂液滴直接浸渍于样品中,对分离富集洁净样品中的低浓度分析物效果较好,但对含固体颗粒或含有能乳化有机溶剂的复杂基质样品的萃取效果较差。
顶空液相微萃取:萃取溶剂液滴与样品基质不直接接触,适用于复杂基质中微量挥发性或半挥发性成分的萃取。
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经典分离方法——液相微萃取法
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经典分离方法——液相微萃取法
静态模式萃取:将有机溶剂液滴悬挂于微量进样器的针头上,萃取一定时间后将溶剂抽回针头中,直接进样分析。操作简单,但易受溶剂的溶解或挥发损失以及脱落的影响,且富集效果相对较差。
动态模式萃取:用微量进样器抽取一定量溶剂,置于萃取位置后抽取空气或水样进入针头,停留一定时间,萃取被吸入微进样器的试样中的目标分析物,而后推出空气或水样但不推出溶剂,如此反复数次,最后将有机溶剂相直接进样分析。动态萃取通过变溶剂微滴为溶剂薄膜,大大增加了萃取的表面积, 使萃取效率更高。
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