文档介绍：Circulating Tumor Cell Test 液体活检之CTC监测技术
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几种肿瘤监测方法
影像学方法()
内窥镜方法
病理学方法
血清肿瘤标志物测定
甲胎蛋白(AFP)癌胚抗原(CEA )
CTC
CellSeach(04年通过FDA认证)
CytoQuest CR
CTC-chip........
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主要内容
CTC循环肿瘤细胞检测技术介绍
CTC 循环肿瘤细胞检测技术临床应用
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循环肿瘤细胞 Circulating Tumor Cell(CTC)
定义:多由自发或者诊疗操作脱离实体灶或者转移灶进入外周循环系统,数量极少。
特点:进入循环系统的肿瘤细胞大部分死亡,只有极少数高度转移性的能够存活,数量为1-10CTCs/ml血液或者1CTC/10^7血细胞。
原发肿瘤血管生成侵润
侵入血管内
侵入血管外 (CTC)
血管内增殖 (CTM)
转移
转移
播散肿瘤细胞(DTC)微转移休眠灶
循环肿瘤细胞(CTC)
循环肿瘤 微栓
(CTM)
凋亡的CTC
侵润
肿瘤细胞 扩增
血管生成
上皮-间质转化
(EMT)
间质-上皮转化
(MET)
转移到骨髓和其他器官
CELLSEARCH技术原理
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:
富集原理(抓得住)
肿瘤细胞大多数来源于上皮细胞所以会带有上皮细胞特有的表面抗原Epcam,Cellsearch用带有Epcam的磁珠富集细胞
显色原理(看得见)
,用带荧光的抗CD45抗体来标记白细胞.
8, 18+, and/or 19+是CTCs特有抗原,用带荧光的抗Cytokeratins抗体来标记CTCs.
(抗HER-2、EGFR),来看CTCs中是否有特定蛋白表达和量
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使用纳米磁流体及免疫荧光技术进行捕获和鉴定
上皮细胞
白细胞
抗 EpCAM 磁流体
EpCAM 抗原
CD45 抗原
CK 抗原
抗 CD45-APC 染料
抗 CK-PE 染料
荧光染料
EpCAM –上皮细胞粘附分子 APC –异藻蓝蛋白荧光染料
CK –细胞角蛋白 PE –藻红蛋白荧光染料 DAPI – 4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DNA荧光染料)
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样本处理过程
CellSave +6