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主要内容:
一、过氧化物酶
二、多酚氧化酶
一、过氧化物酶(POD peroxidase)
01
过氧化物酶是存在于各种动物、植物和微生物体内的一类氧化酶。催化由过氧化氢参与的各种还原剂的氧化反应。
02
过氧化物酶是由单一肽链与一个铁卟啉辅基结合构成的血红蛋白。多数植物过氧化物酶与碳水化合物结合成为糖基化蛋白。糖蛋白有避免蛋白酶降解和稳定蛋白构象的作用。
1过氧化物酶作用方式及分布
过氧化物酶(供体:过氧化氢 氧化还原酶)催化过氧化氢分解时,同时有氢供体参加。
1
酚类、胺类化合物、某些杂环化合物和一些无机离子等都可以作为过氧化物酶的供氢体。
3
H2O2+ AH2 2H2O+A
2
1过氧化物酶作用方式
2过氧化物酶分类
含铁过氧化物酶
正铁血红素过氧化物酶:含有正铁血红素Ⅲ(羟高铁血红素)为辅基,存在于高等植物、动物和微生物中。
绿过氧化物酶:绿过氧化物酶的辅基也含有一个铁原卟啉基团,这类酶存在于动物器官和乳中(乳过氧化氢酶)。
黄蛋白过氧化物酶:含有黄素腺嘌呤二核苷酸作为辅基,这类酶存在于微生物和动物组织中。
过氧化氢酶在植物细胞中以两种形式存在:。
3分布:
以可溶形式存在于细胞浆中
以结合形式在细胞中与细胞壁或细胞器相结合
辣根是过氧化氢酶最重要的一个来源。辣根中20%的过氧化氢酶(POD)与细胞壁结合,用2mol/L NaCl(高离子强度)才能提取出来。辣根中过氧化物酶活力为569,000单位/g组织(蘑菇仅240单位/g组织)。
2 过氧化物酶在食品加工中的应用
过氧化物酶是果蔬成熟和衰老的指标:如苹果气调贮藏中,过氧化物酶出现两个峰值,一个在呼吸转折(成熟),一个在衰老开始。
过氧化物酶的活力与果蔬产品,特别是非酸性蔬菜在保藏期间形成的不良风味有关。
过氧化氢酶属于最耐热的酶类,在果蔬加工中常被当作热处理是否充分的指标。
(速冻蔬菜)
方法:将已热处理的原料中抽取样品,横切,随即放入愈创木酚或联苯胺溶液中,然后取出,%H2O2,数分钟后,用愈创木酚处理的样品变为褐色,联苯胺变为深蓝色,说明过氧化氢酶未被破坏,热处理时间不够,如果均不变色,则表示热处理效果良好。
POD的测定方法:
酸性状态,过氧化物酶血红素和蛋白质部分分离,酶蛋白从天然状态转变到可逆变性状态,活力下降,且热稳定性低;
如青刀豆:,有可溶态,离子结合,共价结合。
过氧化物酶一般都含有多种同功酶,因此最适pH范围较宽。
在中型和碱性状态,酶处于天然状态,蛋白质结构含α-螺旋结构,稳定,酸化后α-螺旋结构破坏,产生β-结构。
1最适pH
3过氧化物酶最适pH和最适温度
差异较大:35-60℃。
不同来源的过氧化物酶在最适作用温度上存在着很大的差别。例如,马铃薯和花菜(均浆)中过氧化物酶的最适温度分别为55℃和35~40℃。