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2025/5/6
目录
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ELISA原理
ELISA简介
ELISA试验环节
ELISA有关仪器、试剂
ELISA简介
酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay),简称ELISA,它是试验室最常用的检测措施。 酶是可以催化化学反应的特殊蛋白质,其催化效力超过所有人造催化剂,ELISA 就是将抗原和抗体的免疫反应和酶的催化反应相结合而建立的一种新技术。使用酶去标识抗原或抗体后来,既不影响抗原抗体反应的特异性,也不变化酶自身的活性。因此ELISA具有精确性高、检测时间短、价格低廉、判断成果有客观原则、成果便于记录和保留等长处,适合于大批标本的检测,广泛应用于食品安全检测、医疗检测以及免疫试验分析等领域。
,并保持器免疫学活性。例如:蛋白质分子构造上的疏水基团与聚苯乙烯表面的疏水基团能产生互作用而吸附。
,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
,可根据加入底物的颜色反应来判定与否有免疫反应的存在,并且颜色反应的深浅是与标本中对应抗原或抗体的量成正比例的,由此进行定性或定量分析。
ELISA基本原理
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体,根据试剂的来源和标本的状况以及检测的详细条件,可设计出多种不一样类型的检测措施,重要类型有双抗体夹心法、间接法、竞争法、捕捉法等。
ELISA类别
双抗体夹心法是检测抗原最常用的措施,先将已知抗体连接在固相载体上,待测抗原与抗体结合后再与酶标二抗结合,形成抗体-待测抗原-酶标二抗的复合物,复合物的形成量与待测抗体原成正比。
双抗体夹心法
当小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的抗体结合位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。
竞争法
双抗原夹心法的反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测对应的抗体。与间接法测抗体的不一样之处为以酶标抗原替代酶标抗抗体。
双抗原夹心法
间接法是检测抗体常用的措施。其原理为运用酶标识的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。
间接法
除了以上常见的4种检测措施外,尚有直接法、捕捉包被法、竞争法(测抗体)、双抗原夹心法、ABS-ELISA法等其他措施。