文档介绍：第五章
常用免疫学检验技术
临床免疫检验是运用免疫学基本的基本原理和技术,检查临床标本中的微生物抗原、肿瘤抗原以及相应的微生物抗体、自身抗体,为感染性性疾病、肿瘤、自身免疫病以及免疫缺陷提供诊断依据。
免疫检验分为两个部分,一部分为利用免疫检测原理检测免疫活性细胞、抗原、抗体、补体、细胞因子、细胞粘附分子等免疫相关物质,另一部分是利用免疫检测原理检测体液中微量物质如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药物浓度、微量元素等。这些检测结果为临床上确定诊断、分析病情、调整治疗方案和判断预后等提供了有效的实验依据。
第一节免疫学检验原理、特点和方法
一、免疫学检验原理
(一)抗原抗体反应是抗原与相应抗体之间的特异性结合反应。它既可发生在体内,也可发生在体外。在体内发生的抗原抗体反应即为体液免疫应答的效应作用。体外的抗原抗体结合反应,根据参与反应的抗原的物理性状(可溶性或颗粒性)以及参与反应的条件(电解质、补体等)不同,表现出不同的现象,如沉淀、凝集、细胞溶解、补体结合和***中和等。一般将检查血清中病原微生物抗原和抗体的试验称为血清学试验。
(二)抗原抗体反应的特点:
1、特异性
抗原抗体反应的特异性(specificity)是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区结合的特异性,由这两个分子之间空间结构的互补性决定的。形同钥匙与锁一样,所以抗原抗体的结合是有高度特异性的。例如白喉抗抗***只能与相应的外***结合,而不能与破伤风外***结合。因此,在抗原抗体反应的免疫学实验中,可以用已知的抗原或抗体来检测特定的相对应的抗体或抗原。
2、比例性
比例性(proportionality)是指抗原与抗体特异性结合反应时,生成肉眼可见结合物的量与反应物浓度的关系,只有当二者浓度比例适当时,才出现可见反应。抗原抗体分子比例合适的范围,称为抗原抗体反应的等价带。在此范围抗原抗体结合充分,沉淀物形成得快而多。
在等价带的前后,由于抗体和抗原的过量,上清液中可测出游离的抗体或抗原,形成的沉淀物少。当抗体过量时,称为前带,抗原过量时称为后带。因此,在抗原抗体反应的试验中,如果没有产生肉眼可见的抗原抗体复合物出现,一方面要考虑是否有抗原与相应的抗体存在,另一方面还必须注意到两者反应的比例是否适当。
3、可逆性
抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性称为抗原抗体结合的可逆性(reversibility)。由于抗原抗体的结合是分子表面的非共价键结合,故形成的复合物是不牢固的,在一定的条件下可以解离,所以说抗原抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一动态平衡过程。