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遵义医学院 级临床（6）班
机能学设计性实验专家讲座
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胰岛素静脉注射对正常家兔降血糖作用
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立项背景：
1、胰岛素于1921年由加拿大人班廷和贝斯特首先发觉，是一个蛋白质激素，由胰脏内胰岛β细胞分泌。胰岛素参加调整糖代谢，控制血糖平衡，应用于临床数十 年，使过去不治糖尿病患者得到挽救。
2、胰岛素主要作用在肝脏、肌肉及脂肪组织，控制着蛋白质、糖、脂肪三大营养物质代谢和贮存。 (1)对糖代谢影响：能加速葡萄糖利用和抑制葡萄糖生成，即使血糖去路增加而起源降低，于是血糖降低。 (2)对脂肪代谢影响：促进脂肪合成和贮存，抑制脂肪分解。糖尿病时糖代谢障碍，脂肪大量动员，产生大量游离脂肪酸在肝脏氧化至乙酰辅酶A，然后变为酮体，若酮体产生过多则出现酮血症。胰岛素能抑制脂肪分解，并促进糖利用，从而抑制酮体产生，纠正酮血症。
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(3)对蛋白质代谢影响。促进蛋白质合成，阻止蛋白质分解。
(4)胰岛素可促进钾离子和镁离子穿过细胞膜进入细胞内；可促进脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)及三磷酸腺苷(ATP)合成 。
3、胰岛素可用于治疗各型胰岛素缺乏糖尿病。主要包含以下几点：（1）一型糖尿病：胰岛素是当前治疗一型糖尿病唯一有效药品，不论有没有急性和慢性并发症，均须终生胰岛素替换治疗，不可突然终止。（2）二型糖尿病：经过控制饮食、体育锻炼和口服降糖药治疗都不能取得良好疗效2型糖尿病患者。
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（3）出现并发症，如增生型糖尿病视网膜病变、严重神经病变、糖尿病肾病、心脏病变、严重皮肤病变及肝硬化、肝炎等糖尿病患者。 （4）出现酮症酸中毒、糖尿病高渗性昏迷和乳酸性酸中毒等各种糖尿病急性或慢性并发症患者。（5）糖尿病合并重症感染、消耗性疾病、急性心 肌梗死、高热、妊娠、分娩、创伤及接收大型手术治疗等糖尿病患者。（6）因全胰腺切除而引发继发性糖尿病患者。（7）因为胰岛素能促进钾离子进入细胞，使血液中钾离子浓度降低而细胞内钾离子浓度升高，故而能够用于治疗高钾血症和心肌梗死早期及预防心肌病变时引发心律失常
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试验动物：健康家兔15只，~,，雌雄不限。
主要仪器：哺乳动物手术器械一套，RGZ-10型婴儿秤，兔手术台，试管架，离心机，722N分光光度计，试管4支，离心管2支，洗耳球，注射器（5ml、10ml各一支），动脉夹，动脉插管，纱布，10ml移液管，缚腿带5根，丝线，废液缸 。
主要试剂和药品：胰岛素（1ml胰岛素+52ml生理盐水），%葡萄糖标准液，蒸馏水，10%三氯醋酸，10%三氯化铁，10g/L肝素钠溶液，250g／L乌拉坦溶液 。
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研究方法：
把15只家兔分别编号为1～15号，均按以下试验方法进行试验，用统计表统计注射胰岛素前后家兔血糖浓度改变，并作假设检验。
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试验方法：
1、试验准备 将2支离心管编号为1~2号及四支试管分别编号为1~4号，2只离心管和3、4号试管分别加入10%三氯醋酸7ml，3号、%标准葡萄糖溶液2ml，将注射器和针头用肝素润湿。
2、标本采集 家兔试验前12h禁食。称重家兔并统计，以250g／L乌拉坦于（4ml／kg）耳缘静脉注射麻醉，仰卧位固定于兔台。然后行颈总动脉插管术。首先，注射前取血：从近心端开始，第1ml弃去不用，再取2ml血放入1号离心管中，用玻璃棒搅匀。随即自耳缘静脉注射胰岛素：。最终，注射后取血：注射胰岛素1h后取血2ml于2号离心管，方法同第一步。（3000转每分，离心5分钟）。
3、制备血浆 将离心后上清液分别倒入1、2号试管中，然后定量1~4号试管取液6ml，分别加入10%三氯化铁12滴，五分钟后在波长为620nm下比色（3号管调“0”，读取1、2、4号试管比色值。），并作好统计
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试验流程图：
家兔称重，麻醉固定
颈动脉插管
取血2ml于1号离心管
，注意第1ml弃去
耳缘静脉
注射胰岛素
取血2ml于2号
离心管，方法同上
进行离心
（3000r／min,5min）
上清液到入对应试管，
且4只试管均定量为6ml,
分别加入三氯化铁12滴
比色
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表1 家兔血糖测定（ml）
试剂
离心管1
离心管2
空白管3
标准管4
三氯醋酸
葡萄糖标准液
—
—
—
蒸馏水
—
—
—
注射前兔血
—
—
—
注射后兔血
—
—
—
取离心上清液于试管定量
三氯化铁（滴）
12
12
12
12
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