文档介绍：第五章免疫放射分析
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第五章免疫放射分析
目的与要求:掌握免疫放射分析(IRMA)原理以及与RIA的区别及方法学。
内容:免疫放射分析(IRMA)是利用125I标记抗体与相应待测抗原进行非竞争性名结合反应,以达到定量分析的目的。
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第一节免疫放射分析的基本原理
一、重点掌握基本原理
IRMA是一种非竞争性的放射免疫分析法,其原理属于非竞争性免疫结合反应。
(一)单位点IRMA原理及其反应式。
(二)双位点IRMA原理及其反应式。
(三)掌握RIA与IRMA的区别。
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三、掌握剂量效应曲线
剂量效应曲线形态直接受标记抗体浓度和亲和力的影响。
(一)抗体浓度对剂量效应曲线的影响。
(二)抗体亲和力对剂量效应曲线的影响。
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第二节免疫放射分析的方法学
一、掌握双位点免疫放射分析方法及特点。其中重点掌握双抗体夹心法,了解标记第三抗体法。
二、双标记抗体法
三、双位点免疫放射分析操作流程可分为正向两步法和反向两步法。
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四、掌握影响免疫放射分析方法的主要因素(一)被测抗原性质
(二)结合在固相抗体上的抗原稳定性。
(三)反应时间和温度
(四)标记抗体温度
(五)固相物的洗涤
(六)血清、电解质和其它质的非特异性效应
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第三节免疫放射分析的特点及其数据处理
一、掌握免疫放射分析特点
(一)IRMA是用标记抗体作为示踪剂。
(二)反应动力学
(三)灵敏度
(四)特异性
(五)标记曲线的工作范围
(六)方法的稳健性
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二、了解免疫放射分析的数据处理的三种常用方法
(一)线性回归法
(二)五参数法
(三)单位点质量作用模型拟合法
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