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色谱柱基础知识
waters色谱柱相关知识
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对HPLC柱填料了解
平均颗粒度，颗粒度分布
颗粒度(dp)
颗粒度越小：柱效越高(传质好，涡流扩散小) 柱压越高(渗透性差)
颗粒分布
颗粒分布越宽∶柱效低(渗透性差)
颗粒形状
球型∶柱效高、重现性好、柱床结构均匀
无定型：柱床结构不均匀 流动相线性速度不均匀 谱带扩展
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对HPLC柱填料了解（二）
平均孔径/孔体积
孔径/孔体积分布
大孔径可分析高分子量分子
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对HPLC柱填料了解（三）
键合相化学
影响化合物分离度：a
不一样键合相对不一样种类化合物分离不一样
可能造成色谱分离机理不一样
如：C18、C8、CN
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硅胶表面及键合相
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键合相色谱柱
以硅胶为基质，经过化学键合方式把碳十八、碳八、胺基等基团联在基质上，作为固定相。
优点∶
固定相稳定，不易流失
应用广泛，可使用各种溶剂
消除硅羟基不良影响
缺点∶
pH值不能小于3
一样填料，各种牌号色谱柱不尽相同
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对HPLC柱填料了解（四）
含碳量
含碳量越高，k'值越大（固定相传质效应增加）
高含碳量
有利于不易保留化合物分离
水解稳定性好，重现性好
有利于极性化合物拖尾改进
低含碳量
有利于分析中性及碱性化合物
降低溶剂损耗
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不一样色谱柱含碳量
色谱柱 C% k'苊 (50/50乙腈/水)
Symmetry C18 19 17
Zorbax ODS 17
LiChrosorb RP-18 15
Symmetry C8 12
Resolve C-18 12
Ultrasphere ODS 11
Partisil ODS-3 11
mBondpak C-18 10
Nova-Pak C-18 7
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对HPLC柱填料了解(五)
填料端基封口
封口残余硅羟基
降低不可逆吸附或拖尾
增加碳含量（% - 1%）
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残基处理效果
NovaPak C18
未封口 C18
① 抗坏血酸
② 烟酰胺
③ 对氨基苯甲酸
④ 哌咯西叮
⑤ 核黄素
⑥ 苯酚
⑦ 盐酸硫胺
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