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单克隆抗体技术简介
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单克隆抗体技术研究背景
杂交瘤技术原理简述
单克隆抗体技术研究进展与意义
单克隆抗体技术研究方向和存在问题
单克隆抗体技术简介
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单克隆抗体技术研究背景
Georges . Kohler
1975年将产生抗体淋巴细胞同肿瘤细胞融合, 成功建立了单克隆抗体技术。
1984年取得诺贝尔医学和生理学奖。
Cesar Milstein
Niels K. Jerne
单克隆抗体技术简介
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理论依据
抗原分子上能够诱导出抗体部位或片段，特称之为 抗原决定基 (antigenic determinant)；一个抗原分子上通常都有许多处抗原决定基，而每个决定基最少都可诱生出一个抗体；所以在传统抗血清中，都含有许各种不一样抗体，分别反抗这些不一样决定基。
对于分子结构相同抗原，因为它们含有共同或相同抗原决定基，所产生抗血清对这两种相同抗原都会产生反应；所以在检定这类抗原时，其 专一性 不很理想，经常会出现假阳性，也称为 交叉反应性。 同时又因为免疫动物个别体质不一样，反抗原反应也有相当差异，以致无法准确控制所得到每批抗血清 效价 高低。
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血清中每一个抗体是由单一个B细胞 所分泌产生，若能把此 B 细胞由脾脏中挑出来，单独培养成细胞株，则可得单一个类抗体，只会对一个 抗原决定基 反应，其专一性极高。 大量培养此细胞株，即可有质量一定、纯度均一抗体，此即为 单株抗体。
然而 B 细胞不易在培养基中生长，即使有些人一直努力，想找出在体外培养脾脏细胞条件，但结果均不甚理想，所以上述想法不易达成。
癌细胞 生长不受控制，很轻易在培养基中生长，有很多已经建立好癌细胞株，其生长特征均已了解； 若把癌细胞永续生长特征，利用细胞融正当导入可生产有用抗体 B 细胞中，则得到可在培养基中永久生长 B 细胞株，此即融合瘤细胞株。
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杂交瘤技术原理简述
动物免疫
细胞融合
杂交瘤细胞筛选
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动物免疫
动物体内B 淋巴细胞在特定外来抗原刺激下, 能够大量增殖变成浆细胞, 以分泌针对该抗原抗体。
这种抗体含有特异性, 动物免疫作用就是用特定外来抗原对动物进行一次或屡次免疫,以刺激其能分泌对于该抗原B 淋巴细胞大量增殖, 从而得到大量产生专一反应B 淋巴细胞。
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细胞融合
B 淋巴细胞受外来抗原刺激后能够分泌抗体, 但在体外存活时间很短（最多两周）后即死亡。
而骨髓瘤细胞不分泌任何免疫球蛋白, 却能在体外长久存活。
假如将这两种细胞特征结合起来, 就能得到既能分泌抗体又能在体外长久存活细胞。
然而在杂交过程中必定将产生混合物, 所以就需要深入筛选出其中唯一有用杂交瘤细胞。
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杂交瘤细胞筛选
杂交瘤细胞因为继承了B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞双重特征。
能够合成HGPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）和TK（胸腺嘧啶激酶）, 故在HAT (H-次黄嘌呤、A -氨基喋呤、T-胸腺嘧啶)培养基中可长久存活。
在历经2 周左右时间后即可得到该杂交瘤细胞, 成为制造单克隆抗体细胞源。
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单克隆抗体技术研究进展
单克隆抗体生殖健康诊疗试纸
早早孕检测试纸条
女性在怀孕以后体内会分泌绒毛膜促性腺激素。早期检测该激素, 对女性含有非常主要指导意义。
女性排卵检测试纸条
准确检测出尿液中促黄体生成激素峰值水平, 使女性能预知最正确受孕或避孕时间。
乙肝表面抗原检测试纸条
特异性地检测标本中乙肝表面抗原, 重复性好, 质量稳定。
吗啡类毒品检测试纸条
样品中吗啡含量大于300ng／mg，即可被检出。
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