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细胞内的碱性磷酸酶在碱性环境中，可水解B ■甘油磷酸钠， 释放的磷酸根离子与钙离子作用而生成磷酸钙沉淀，与硝酸 钻作用后生成磷酸钻，最终与硫化钱作用生成黑色稳定的硫 化钻颗粒，定位于胞浆中。
标本釆集
病人预备：了解病人是否对局麻药有过敏史，凝血因子 严峻缺陷引起的出血
性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠的妇女作骨穿时要慎重。
标本种类：颖抽取的骨髓穿刺液。
标本采集要求：
高压消毒的穿刺针，一次性无菌手套和抽取骨髓液的 无菌注射器。
临床上首选穿刺部位为骼后上棘，翻身困难，需多部 位穿刺患者可选择骼前上棘为穿刺部位。小于 3 岁的小儿还 可选择胫骨头内侧为穿刺部位。
标本储存：滴加 95%乙醇盖满血膜 10 分钟，水洗待干, 室温避光保存。
标本运输：室温运输。
标本拒收的标准：溶血，稀释标本不能作测定。
试剂：
孵育液;由 10%巴比妥钠 4ml, 25g/LMgSO4 4ml, % B
■甘油磷酸钠 4ml, 20g / LCaC126ml,再加蒸镭水 22ml 配成。Mg2+起酶激活作用，巴比妥钠供给碱性环境，调PH
20g/L 硝酸钻，可重复使用或长期保存。
硫化钱溶液，由硫化钱 1—2ml 加水到 100ml 配成。
1%甲绿作复染用，使红细胞和粒细胞核显绿色，有利于结果观看。
操作步骤：
颖、枯燥涂片用 95%甲醇固定 10 分钟。
水洗后，将涂片浸于孵育液中，37°C 水浴 2 小时。
20g/L 硝酸钻溶液作用 5 分钟。
流水充分洗净多余的硝酸钻后，参加硫化镀溶液 2 分钟。
流水洗去硫化镀，1%甲绿溶液复染 20 分钟。
流水冲洗，待枯燥，油镜观看。
&结果推断：(-)：胞浆无灰黑色成分。
(十)：胞浆呈浅灰色或局部胞浆有灰色沉淀。 (++)：胞浆呈均匀棕色或棕黑色沉淀，但着色较淡。
(+++)：胞浆内布满黑色颗粒。 (++++)：胞浆内布满黑色颗粒，而且沉淀掩盖到核上。
报告方法
报告阳性率和积分值。
阳性率：计数 100 个成熟中性粒细胞，求得阳性细胞的百分率。
积分值：将全部阳性反响的细胞均换算为 1 个〔十〕强度后的
总和。
例如:〔十〕有 20 个细胞，〔++〕有 10 个细胞，〔+卄〕有 5 个细 胞，〔+卄+〕有 2 个细胞，则其积分值为〔20X1〕十
〔10X2〕十〔5 X3〕十〔2X4〕 = 63 分。
参考值
其正常参考值因试验室条件不同和个体差异等因素而影响， 变化较大。一般界限，阳性率为 20 一 40%,平均积分为 20— 60 分。
•临床意义：NAP 的积分，参考值为 35 70 分。
生理性变化：生儿NAP 活性增加，以后下降，成人 较儿童活性减低，老年期更低。应激状态如紧急，恐惧，激 烈运动等 NAP 活性可增加。月经前期增高，行经后降低， 经后期恢复。
病理性变化：
NAP 积分增加：见于细菌性感染，再障，某些骨髓增殖性疾病〔如慢粒，骨髓纤维结，真性红细胞增多症，原发性血小板增多症〕，慢粒加速期和急变期，急淋白血病，慢淋白
血病，恶性淋巴瘤，骨髓转移癌，肾上腺糖皮质激素及雄激素治疗后。
1122 NAP 积分下降：慢性粒细胞白血病慢性期，阵发性睡 眠性血红蛋白尿，MDS,恶性组织细胞病。
操作性能：快捷简便，特异性强，灵敏度高。
参考文献：