文档介绍：实验二:小鼠血液标本的采集及血清分离
采集方法
鼠尾采血——当所需血量很少时采用本法。固定小鼠并露出鼠尾,将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45-50℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)-,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。
断头取血——当需要较大量的血液,而又不继续保存动物生命的采血方法。左手握住动物,右手持剪刀,快速剪掉头颈部,倒立动物让血液滴入容器。需注意防止断毛落入容器中。
眼眶静脉丛采血——当需用中等量的血液,而又避免动物死亡时采用的方法。采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠的颈部,应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1mL注射器,使采血器与鼠面成45 º的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入深度,小鼠约2-3mm,大鼠约4-5mm。
鼠尾采血
断头取血
眼眶静脉丛采血
实验三:胶体金方法检测
人血清表面抗体水平
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利用胶体金呈现颜色(红色)反应,检测抗原/抗体。试纸被滴加样品溶液后,溶液中的抗原随溶液爬行至结合垫处,与其中的胶体金标记抗体1反应形成红色的抗原抗体复合物,然后继续层析移动向前。在观察窗口的检测线(T)处,红色免疫复合物中的抗原被此处预先包被抗体2捕获并截留下来,随着红色复合物截留量增多,逐渐形成一条红线,因此根据红色T线的出现即可判定样品溶液为阳性。如果样品中没有抗原,则不形成免疫抗原抗体复合物,流过T处,不发生捕获截留,T处保持白色,判定为阴性。
实验方法与步骤
150μl
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150μl血清
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