文档介绍：悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用
作者:蔡英兰, 金政, 朴丽花, 李相伍, 金美善
【关键词】悦肝胶囊;,,肝损伤;,,大鼠;,,肝细胞
摘要:l4)损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用。l4诱导大鼠肝细胞损伤模型,观察悦肝胶囊对肝细胞的琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)活性和糖原含量以及肝细胞形态结构的影响。结果悦肝胶囊能显著提高SDH、G6Pase活性及糖原含量,抑制ACPase活性,并可显著改善受损肝细胞的形态结构变化。结论 l4损伤原代培养大鼠肝细胞具有保护作用。
关键词:悦肝胶囊; 肝损伤; 大鼠; 肝细胞
Protective Effects of Yuegan Capsule l4induced Injury of Primary Cultured Rat Hepatocytes
Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of Yuegan Capsule l4intoxicated primary cultured rat injury models were induced l4 in rats in vitro, and treated with Yuegan of rat hepatocytes and effect of SDH、ACPase、G6Pase activeties and amount of hepatic glycogen were observed. ResultsThe Yuegan Capsule increased the activity of SDH, G6Pase and the amount of hepatic glycogen, and restrain the activity of ACPase, and could improve the changes of rat hepatocytes capsule has protective effects l4induced injury of primary cultured rat hepatocytes.
Key words:Yuegan Capsules; Liver failure; Rats; Hepatocytes
悦肝胶囊主要由葛根、丹参、西洋参、麦冬等中药组成,是吉林省延边中医院肝病科以“活血化瘀、通络养肝”为基本治则而研制的复方中药制剂,具有利胆退黄及保肝解毒作用[1,2]。原代培养肝细胞已用于多方面的研究,其灵敏度高、参差性小、再现性好。l4诱导大鼠肝细胞损伤模型,l4损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用,并进一步探讨了其机理。
1 材料
动物 Wistar系大鼠(乳鼠)由延边大学医学部资产与实验管理办公室实验动物科提供。
药品与试剂悦肝胶囊:延边大学医学部药学院天然药物教研室分离、提取(葛根30 g,丹参30 g,麦冬20 g,西洋参20 g,加蒸馏水煮1 h后过滤,滤出液备用,把原药再煮沸1 h后过滤,混合2次滤液浓缩成100 ml);CCl4:北京化学试剂厂产品;东宝肝泰片:中国通化东宝药业股份有限公司产品;新生小牛血清:杭州四季青生物工程公司产品;RPMI1640培养基:GIBCO公司产品;胰蛋白酶:DIFCO公司产品;胶原酶:SIGMA化学公司产品。
仪器 SC35型倒置显微镜:日本OLYMPUS产品;VANOX型万能显微镜:日本OLYMPUS产品;S3500N型扫描电镜:日本HITACHI公司产品;TD2000型图像分析仪:北京天地百年科技有限责任公司产品。
2 方法
原代单层乳鼠肝细胞培养方法采用姜玉顺等[3]建立的方法培养至3~4 d后用于实验。
,5,7 mol/L浓度经筛选,选用5 mol/L浓度为本实验可逆性肝细胞损伤模型。
分组培养大鼠肝细胞3~4 d,取生长良好的培养瓶40瓶分为4组。正常对照组每隔3天更换培养基;模型对照组加入5 mol/l4 ;药物对照组加入 5 mol/l4 + mg/L 东宝肝泰;实验组加入5 mol/l4+ mg/L悦肝胶囊。作用24 h后,模型对照组换接种培养基; mg/L东宝肝泰的培养基; mg/L悦肝胶囊的培养基继续培养。
细胞化