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考点1 微生物的培育与应用
、培育皿、接种环、试验操作者的双手、空气、牛奶所接受的灭菌或消毒方法依次是( A )
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥
C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
解析：培育基用高压蒸汽灭菌；培育皿耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到快速彻底的灭菌效果；试验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其养分成分可接受巴氏消毒法。
( C )
①可以用相同的培育基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌
A．①② B．③④
C．①③ D．②④
解析：平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培育基，故①正确；平板划线法接受接种针进行操作，而稀释涂布平板法接受涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避开空气中的微生物混入培育基，故③正确；平板划线法一般用于分别而不是计数，故④错误。
，划线的挨次为1、2、3、4、5，下列操作方法正确的是( D )
A．操作前要将接种环放在火焰旁灭菌
B．划线操作须在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
解析：在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰旁进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培育即可获得所需菌落。
4.(2021·济南一模)白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子附着在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开头萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：
(1)从自然菌样中筛选较抱负生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培育→ 纯种分别 →性能测定。白僵菌的菌样应从 感病昆虫 处采集。
(2)分别白僵菌菌种的培育基属于 选择 培育基。在配制白僵菌培育基时加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于 碳源 养分物质。
(3)白僵菌纯培育常用的接种方法是 平板划线法 和 稀释涂布平板法(或稀释混合平板法) 。
(4)分别与培育过程中，培育基和接种工具都要进行 灭菌 处理，利用高温可以使微生物的
蛋白质和核酸 等物质发生变性。
解析：选择培育基用于选择分别菌种。蔗糖属于微生物的碳源。微生物分别培育过程中，培育基、接种工具都要进行灭菌处理，其原理是高温使蛋白质、核酸变性而使细胞失去活性。
考点2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数
考点3 分解纤维素的微生物的分别
，对培育基的要求是( B )
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐
⑧不加硝酸盐
A．①③⑤⑦ B．①③⑤⑧
C．②④⑥⑧ D．①④⑥⑦
解析：分别土壤中分解尿素的细菌，应当以尿素为唯一氮源，不用加硝酸盐来供应氮源；另外还要加葡萄糖供应碳源；加琼脂配制固体培育基，以利于分别、鉴定、计数等。
，在对应稀释倍数为106的培育基中，得到以下几种统计结果，正确的是( D )
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238
C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163
D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233
解析：在设计试验时，确定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增加试验的说服力与精确 性，所以A、B不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可能毁灭了错误，此时，不能简洁地将3个平板的计数值用来求平均值。
：(1)在缺乏氮源的培育基上大部分微生物无法生长；(2)在培育基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；(3)在培育基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。依次利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别出( B )
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④圆褐固氮菌
⑤根瘤菌
A．⑤、②、③ B．④、②、③
C．②、②、④ D．④、③、②
解析：利用(1)可以分别出圆褐固氮菌(自生固氮菌)，而不能分别出根瘤菌(共生)；利用(2)可以除去①和③而分别出②，再用(3)除去①而分别出③。
，不正确的是( C )
A．刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入
B．刚果红可以在菌落形成后加入
C．刚果红在菌落形成前倒平板时加入，加入的刚果红不需要灭菌
D．在菌落形成后加入刚果红时，刚果红不需要灭菌
解析：从对两种筛选纤维素分解菌的方法进行比较分析入手，结合微生物培育过程无菌条件的把握方法来解答该题。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，毁灭以纤维素分解菌为中心的透亮 圈，我们可以通过是否产生透亮 圈来筛选纤维素分解菌。刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入。若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌。
：采集菌样→富集培育→纯种分别→性能测定。
(1)不同微生物的生存环境不同，获得抱负微生物的第一步是从适合的环境中采集菌样，然后再按确定的方法分别、纯化。培育嗜盐菌的菌样应从 海滩等高盐 环境中采集。
(2)富集培育指创设仅适合待分别微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分别出所需微生物的培育方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培育应选择 以淀粉为唯一碳源 的培育基，并在 高温 条件下培育。
(3)下面两图是接受纯化微生物培育的两种接种方法接种后培育的效果图解，请分析接种的具体方法。
获得图A效果的接种方法是 稀释涂布平板法 ，获得图B效果的接种方法是 平板划线法 。
(4)配制培育基时各种成分在溶化后分装前必需进行 pH调整 ，接种前要进行 高压蒸汽灭菌 ，在整个微生物的分别和培育中，确定要留意在 无菌 条件下进行。
解析：(1)嗜盐菌生活在高盐环境中，如：海滩等。
(2)耐高温淀粉酶应存在于以淀粉为唯一碳源且在高温环境中生存的微生物体内。
(3)从不同菌落之间的关系可以看出，A纯化微生物的接种方法是稀释涂布平板法，B纯化微生物的接种方法是平板划线法。
(4)培育基配制时应先溶化，再调整pH，灭菌。