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最低抑菌浓度(MIC)测定
菌悬液的制备
刮取18~20小时的培养物,在管壁上充分研磨后混悬于1ml缓冲液中,借助比浊仪,调菌悬液浓度至104/ml,于1小时内用多点接种仪接种(放置室温应大于25℃)。
MIC测定
抗菌药物储存液制备
抗菌药物称量及配制:根据各抗菌药物的纯度称取,以目前所用抗菌药物为例。
抗菌素
纯度
称量(mg)
加溶剂(ml)
储存液浓度(mg/ml)
四环素
100%
1
3200
大观霉素
%
1
25600
头孢曲松
%
1
2000
环丙沙星
1
3200
分装与保存:每管200ml,-70℃可保存一年。
抗菌药物工作液制备
青霉素:
管号
原液
0
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
浓度(mg/ml)
3200
1600
800
400
200
100
50
25
取量(ml)
200
→
200
→
200→
200
→
200→
200→
200
→
200→
200
→
200
→
200→
200→
200
溶剂(ml)
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
四环素:
管号
原液
0
1
浓度(mg/ml)
3200
1600
800
取量(ml)
200
→
200
→
200
溶剂(ml)
200
200
200
大观霉素:
管号
0
7
6
5
4
3
2
1
浓度(mg/ml)
25600
12800
6400
3200
1600
800
400
200
取量(ml)
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
溶剂(ml)
200
200
200
200
200
200
200
200
头孢曲松:
管号
原液
0
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
浓度
(μg/ml)
2000
200
100
50
25
取量(μl)
40
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
溶剂(μl)
360
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
环丙沙星:
管号
原液
0
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
浓度(ug/ml)
3200
1600
800
400
200
100
50
25
取量(μl)
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
→
200
溶剂(μl)
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
抗菌药物梯度培养皿的制备
培养皿编号:按各抗菌药物浓度编号。
将配制好的各抗菌药物工作液150μl加到各培养皿中,与15ml 50℃预温的培养基充分混匀,平放在超净台内,半开培养皿盖至培养基凝固后,用塑