文档介绍：HPLC法测定四君颗粒中的甘草酸含量论文
.freelasil ODS1 C18柱,甲醇--冰醋酸(67∶33∶1)为流动相,,λ=250nm;[结果]~1?g范围内呈良好线性,回归方程为Y=444185X- r=,%、RSD%%(n=6);[结论]方法简便、准确, for detemining the content of Glycyrrhizinatic acid in Sijunzi Keli by HPLC.[Methods]Using Kromasil ODS1 C18 Column,methyol- ammonium acetate-acetic acid glacial(67∶33∶1) as the mobile phase,detection and flol/min.[Results]The Calibration Curve ethod ple and accurate and proper,ethod of Radix et Rhizoma glycyrrhizae in Sijunzi Keli and the reduplication of the result m,5μm)。(2)流动相:甲醇--冰醋酸(67∶33∶1)。(3)检测波长:测定甘草酸的紫外吸收波长,证明他们在250nm有较大吸收,确定为250nm为检测波长,阴性对照无吸收峰。(4)流速:;进样量:10μl。在此色谱条件下,对照品(图谱1)及经前处理后的供试品的甘草酸与其它组分基本达到分离(图谱3)。
对照品的制备
精密称取真空干燥(五氧化二磷)24h的甘草酸单铵盐对照品适量,精密称定,用流动相溶解并制成每1ml含50μg(己折合为甘草酸)的溶液,摇匀,即得()。
供试品溶液的制备
取本品粉末约5g,精密称定,置50ml量瓶中,加流动相约45ml,超声处理(功率250in,取出,放冷,加流动相至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
标准曲线
取“对照品的制备”项下的对照品溶液,分别进样2、5、10、15和20μl,按选定的色谱条件测定峰面积,以进样量(μl)为横坐标,峰面积为纵坐标,作图并进行线性回归,计算回归方程为Y=444185X- r=~,见表1。表1 标准曲线(略)
检测限
精密称取甘草酸单铵盐适量,用流动相多级稀释后进样,结果在信噪比(S/N)为3时,。结果见图1。
阴性样品的测试
做缺甘草的样品;按供试品制备法制备供试品后测定,分别测定在甘草酸相应位置无明显峰出现(图2)。
精密度试验
(1)日内精密度试验:取甘草酸铵对照品溶液,同一天不同时间进样6次,每次10μl,记录峰面积,%,见表2。(2)日间进样精密度:取甘草酸铵对照品溶液,连续6天,每天进样