文档介绍：HIV核酸检测及婴幼儿诊断
HIV核酸检测的意义
早期诊断
婴儿的早期诊断:HIV感染母亲所生小于 18个月龄的婴儿,不同时间的两次HIV核酸检测均为阳性即可作出诊断。18个月龄以上儿童诊断与***相同:有急性HIV感染综合症或流行病学史,且不同时间的两次HIV核酸检测结果均为阳性,即可诊断。
也可使用多样品集合的方法,对采供血机构的原料血浆以及HIV抗体阴性的高危人群样品进行集合核酸检测,及时发现窗口期感染,降低“残余危险度”,减少二代传播。
疑难样本的辅助诊断
在一般情况下,HIV抗体检测足以对HIV感染与否做出正确诊断,但在特殊情况下,单纯HIV抗体检测结果不能进行明确的诊断,如在感染早期或疾病终末期出现抗体不确定反应时,RNA的测定结果可帮助提供HIV感染早期或终末期的证据。由于试剂的灵敏度、接受有效的抗病毒治疗后以及存在长期低水平病毒的少数感染者等原因,应对其它检测数据和样品背景情况进行综合判断。
遗传变异监测
可用于HIV分子流行病学监测,包括HIV-1和HIV-2感染的鉴别诊断、HIV感染传播链的分析、HIV基因亚型和重组病毒的鉴定和分析以及人群HIV遗传变异趋势的监测
耐药性监测
可用于HIV耐药检测和监测,指导公共卫生医生了解耐药性病毒株流行的态势和指导临床医生判断抗病毒治疗效果和修改抗病毒治疗方案。
指导抗病毒治疗及疗效判定
通常在病毒载量达到一定水平后(如>35,000~50,000c/ml)抗病毒治疗才显示良好的治疗效果。治疗后,通过病毒水平的检测能够确定治疗是否有效。 log以上才被认为临床有效。
样本采集原则
样品恰当的采集、保存和运送是所有检测需要考虑的很重要的一部分。
样品的采集和保存时,要使用无菌技术,包括消毒管、吸头和试剂及工作环境都要防止样品污染。
样品的采集
艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。病毒载量通常不使用全血。
血清的检测结果大约是血浆的50%(30~80%),可能是因为HIV病毒颗粒被包裹在纤维蛋白网络中
血浆中RNA量比血清中高并稳定。
全血中病毒载量非常不稳定。
EDTA抗凝的RNA比肝素、ACD好,并且肝素对PCR扩增有抑制作用。(用ACD抗凝的样品检测结果大约会比EDTA抗凝的样本低15%)
采集的样品应在4~8小时以内分离血浆。