分子生物学 核酸分子杂交.ppt

文档介绍：分子杂交技术
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她通过基因检测得知自己本身携带BRCA-1突变基因,罹患乳腺癌及卵巢癌的风险巨大, 医生评估她患乳腺癌几率为87%,经过一些手术降低成5%。
Q:医生是如何快速准确地检测出安吉丽娜·朱莉携带BRCA-1突变基因?
主要内容:
一、分子杂交简介
二、核酸杂交技术
三、蛋白杂交技术
四、基因芯片
概念
凝胶电泳分离待测DNA、RNA或Pr并转移固定到结合物上,然后与探针/抗体杂交分析。
原理
碱基互补配对原则(核酸变性和复性)/抗原-抗体反应。
一、分子杂交简介
二、核酸分子杂交技术
基本概念
DNA变性
DNA双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,形成单链无规则线团,因而发生性质改变(如粘度下降,沉降速度增加,浮力上升,紫外吸收增加等) 。
DNA复性
DNA发生热变性后,经缓慢降温,例如放置室温逐渐冷却,解开的互补链之间对应的碱基对再形成氢键,恢复完整的双螺旋结构,称DNA热变性的复性。
核酸分子杂交
概念:具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下,按碱基配对原则形成双链的过程。
RNA
DNA
复性
核酸探针
概念:
一小段用放射性同位素、生物素或荧光染料进行标记的已知序列的核酸片段,即为探针(probe)。
探针可用于分子杂交,杂交后通过放射自显影、荧光检测或显色技术,使杂交区带显现出来。