文档介绍:正规土壤报告
一、实验目的
在学习理论知识的基础上自己设计实验方案分离和鉴定出土壤中三类微生物的几种,在此基础上系统地掌握微生物生态学、形态学以及营养方面的理论知识及在实践中的运用; 提高微生物研究相关的基本操作技能,尤其是消毒灭菌的方法和原理、培养基的制作、建立无菌操作概念、划线分离纯化菌种、微生物的基本形态学鉴定和保藏方法,提高动手能力和运用理论知识解决实践中问题的能力。
二、实验 原理
从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。平板分离法普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其他微生物生长的环境,从而淘汰一些不需要的微生物。微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落,通常是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。本实验采用平板划线的方法完成。值得指出的是,从微生物群体中经分离生长在平板上的单个菌落并不一定保证是纯培养。因此,纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到。土壤是微生物生活的大本营,它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。因此土壤是微生物多样性的重要场所,是发掘微生物资源的重要基地,可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。本实验将分别采用牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号与PDA培养基从土壤中分离不同类型的微生物。
三、实验前准备。
1、实验材料
 
A、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(培养细菌):
,蛋白胨2g,Nacl1g, 琼脂3-4g,水200ml,~
B、高氏l号培养基(培养放线菌)
可溶性淀粉4g,KNO3 ,NaCl ,K2HPO4·3H2O ,MgSO4·7H2O ,FeSO4·7H2O ,琼脂3-4g,水200mL,~。
C、PDA培养基(加葡萄糖用于培养酵母菌,加蔗糖用于培养霉菌)
马铃薯(去皮)80g,蔗糖与葡萄糖分别8g,水400g,琼脂6-8g.
  溶液或试剂  
盛9ml无菌水的试管六支
:试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、报纸、记号笔、线绳、纱布、无菌玻璃涂棒,无菌吸管,接种环,无菌培养皿,土样,显微镜等。
取土壤:阴雨天,18-20度,黄色的土壤,这是在花圃里找开花较多的花丛下离地面5-10厘米的土壤,由于酵母菌喜好糖份较多的土壤环境生存,所以我们猜想那里的土壤含的酵母菌会比较多:在叶子覆盖得较多的花丛下离地面5-10厘米处的土壤,由于霉菌和放线菌在这些土壤中会比较多;而细菌在什么环境下都比较多,所以不用找特殊的土壤。
无菌水及相关器材的灭菌
把所需要的器材都用报纸包扎好,把各装了9ML水的6支试管包扎好放进高压蒸气灭菌锅灭菌,在126度灭菌15分钟。
设计分离提纯土壤中微生物的基本流程(在无菌情况下进行)
倒平板→稀释土壤溶液→划线→培养→挑单菌落→保存
倒平板
在无菌的风箱里,点着酒精灯,右手拿着装着培养基的锥形瓶,左手尾指与无名指托着培养皿