可见分光光度法和紫外分光光度法.ppt

文档介绍：第十三章可见分光光度法和紫外分光光度法
Visible Spectrophotometry and Ultraviolet Spectrophotometry
内容提要
物质的吸收光谱
分光光度法基本原理
透光率和吸光度
Lambert-Beer定律
可见分光光度法
分光光度计
测定方法
提高测量灵敏度和准确度的方法
紫外分光光度法简介
教学基本要求
了解光的基本性质及物质对光的选择性吸收。了解吸收光谱的意义。
掌握分光光度法的基本原理,Lambert-Berr定律以及透光率、吸光度、摩尔吸光系数、质量吸光系数等基本概念及相互关系。了解光的加和性。
了解分光光度计的基本构造,熟悉可见分光光度法的测定方法­标准曲线法和标准对照法,了解比吸光系数比较法和差示分光光度法。
了解提高测量灵敏度和准确度的方法。
了解紫外分光光度法的一般概念
第一节物质的吸收光谱
一、物质对光的选择性吸收
光照射某物质,物质能够吸收光,使原有的基态转为激发态,只有当分子的能量(h)与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差(E)相等时才能被吸收。
M(基态)+ hM*(激发态)
物质对光的吸收具有选择性,若溶液选择性地吸收了某种颜色的光,则溶液呈吸收光的互补光。
第一节物质的吸收光谱
第一节物质的吸收光谱
二、物质的吸收光谱
将不同波长的单色光依次通过有色溶液,测量溶液的吸光度A(absorbance)。
以波长为横坐标,吸光度A为纵坐标作图,得吸收曲线,或称吸收光谱。
吸收光谱中,吸光度最大处的波长为最大吸收波长,用max表示。
一般,max是定性鉴别物质的基础。
不同浓度的溶液,max不变,浓度与峰值成正比,这是进行定量分析的依据。
第一节物质的吸收光谱
三(邻二氮菲)合铁(II)离子的吸收光谱图
max=510nm
不同浓度的溶液,max不变,浓度与峰值成正比。
第二节分光光度法基本原理
一、透光率和吸光度
入射光强度I0,吸收光强度Ia,透过光强度It, 反射光强度为Ir
I0 ═ Ia + It + Ir
被测溶液和参比溶液的吸收池同样材料和厚度,反射光强度影响相互抵消,上式简化为
I0 ═ Ia + It
第二节分光光度法基本原理
一、透光率和吸光度
透射光的强度It与入射光强度I0之比称为透光率(transmittance),用T表示
透光率的负对数称为吸光度,用符号A表示。A愈大,溶液对光的吸收愈多。
第二节分光光度法基本原理
二、Lambert-Beer定律
Lambert- Beer定律:
A =bc
溶液厚度b,单位cm;浓度c,单位molL-1;摩尔吸光系数,单位Lmol -1cm-1
若用质量浓度代替c
A ═ ab
质量吸光系数a的单位Lg -1cm-1
a和可通过下式相互换算
═ aM