文档介绍：临床微生物检验基本技术
汤丽霞、何印蕾
费世杰、何涛
实验二
目录
一、目的要求
二、实验材料
三、实验方法
(一)接种与分离工具
(二)接种与分离方法
(三)细菌的培养方法
四、实验内容
实验程序
1、掌握常用接种与分离方法。
2、掌握需氧培养方法。
3、掌握无菌操作基本技术。
一、目的要求
1、接种环、接种针、涂布棒、吸管、酒精灯。
2、培养基(上次实验配制的)。
3、恒温培养箱。
二、实验材料
(二)实验原理
在自然界中,不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起的,为了生产和科学研究的需要,当我们希望获得某一种微生物时,就必须从混杂的微生物类群中分离出它,以得到只含有这一种微生物的纯培养物,这种获得纯培养物的方法称为微生物的分离与纯化。
为了获得纯种的微生物,一般根据该微生物营养或培养特点,或对某种抑制剂的耐受性不同,或对某种环境条件要求不同,从而制作或设置一些选择性培养基,或选择性培养条件,再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或划线法分离,纯化该微生物,直至得到该纯种菌株。
三、实验原理
接种与分离工具
(1)接种环
(2)接种针
(3)涂布棒
(4)无菌棉拭子
(一)接种与分离工具

2、斜面接种法

(二)接种与分离方法

对混有多种细菌的临床标本,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散的单个菌落,以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法:
(1)分区划线分离法
(2)连续划线分离法
实验一
(二)接种与分离方法
(1)分区划线分离法:
此法常用于含菌量较多的标本如痰、泌尿生殖道的分泌物和粪便或混合细菌的分离。
Ⅰ.划线时接种环与平皿约成30-40度角,轻轻接触,以腕力在琼脂表面轻快滑动,不能划破琼脂。
Ⅱ.第一次划线应占平皿面积的1/5,以后每次划线约占面积的1/4—1/5。
Ⅲ.划线为连续划线,不能间断应占满平皿,划线不能交叉重复。
Ⅳ.每次划完后接种环应灭菌。
实验一
(二)接种与分离方法
分区划线分离法: