文档介绍：专题5 DNA和蛋白质技术
讨论1:如何证明DNA是遗传物质?
讨论2:怎样才能将细胞内的这些物质分离出来?
(1) mol/L的***化钠溶液中的溶解度最低,利用这一原理,可以使溶解在***化钠溶液中的DNA析出。
(2)DNA不溶于酒精,细胞中某些蛋白质则溶于酒精
(3) DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
DNA在80度以上才会变性
洗涤剂对DNA没有影响
DNA的性质: 1、DNA的溶解性
一、实验原理:
2、DNA分子的鉴定
沸水浴条件下,加入二苯***试剂,用玻棒搅拌使DNA溶解,溶液出现浅蓝色。
100度
DNA+二苯***蓝色物
二、实验设计
(一)、实验材料的选取:
讨论: 用什么材料提取DNA?为什么?
(教材P55提供的材料)
提示:1、材料要容易得到
2、材料中DNA含量必须丰富
(二)、实验步骤:
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,离心处理;
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向鸡血细胞液中加入蒸馏水,搅拌、过滤;
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加入2mol/L的***化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态;过滤
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加入蒸馏水,用玻璃棒搅拌;过滤;
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加入2mol/L的***化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态,过滤
思考题9:为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;
用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。
因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
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加入冷却的95%的酒精,搅拌;
:
取两支试管,各加入2mol/L的***化钠溶液5mL,一支加入提取的DNA,两支各加入4mL的二苯***试剂。混合均匀后置于沸水中加热。
思考题12:为什么要设置对照组?实验中能观察到什么现象?
确定二苯***不与***化钠发生颜色反应;实验组试管中可看到溶液变蓝色
填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。
⑴提取鸡血细胞中核物质:
⑵溶解核内DNA:
⑶析出2mol/LNaCl溶液中的DNA:
⑷DNA粘稠物的再溶解:
⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物:
⑹DNA的鉴定:
⑴蒸馏水⑵2mol/LNaCl溶液⑶蒸馏水
⑷2mol/LNaCl溶液⑸冷却的95%的酒精⑹二苯***