文档介绍：血细胞的计数
【目的要求】
学****红细胞、白细胞计数的方法。
【基本原理】
血液中血细胞数的计算是使用血细胞计数板。而且要用适当的溶液将血液稀释后,放入计数板的计数室内,在显微镜下计算一定容积血液稀释液中的血细胞个数,再将所得结果换算为1mm3 血液中的血细胞个数。
【动物与器材】
兔、血细胞计数板、血红蛋白吸管、1ml 和5ml 吸管、表面皿、显微镜、刺血针、酒精棉球、红细胞稀释液、白细胞稀释液、95%酒精、***、1%氨水。
【方法与步骤】
白细胞稀释液放入表面皿内备用,另用5ml 红细胞稀释液放入表面皿内备用。用酒精棉球消毒兔的耳缘静脉采血部位,用刺血针刺破血管,让血液自然流出,擦去第一滴血,待流出第二滴血时,用血红蛋白吸血管吸血至刻度20mm3 处,将血液吹入盛有白细胞稀释液的表面皿内,吸上清液冲洗沾在管壁上的血液。立即将吸管洗净和干燥备用。再用同样方法吸取血液至刻度20mm3处,并将血液吹入盛有红细胞稀释液的表面皿内,轻轻摇匀。,板面的中部有4 条直槽,内侧两槽中间有一条横槽把中部隔成二长方形的平台(图3-3)。,当放上盖玻片后,平台与盖玻片之间距离(即高度)。平台中心部分各以3mm 长,3mm 宽精确划分为9 个大方格,称为计数室(图3-4),每个大方格面积为1mm3,。四角的大方格,又各分为16 个中方格,适用于白细胞计数。中央的大方格则由双线划分为25 个中方格,,。每个中方格又各分成16 个小方格,适用于红细胞计数。稀释后的血液滴入计数室前将表面皿摇振1-2min。将盖玻片放在计数板正中,用小吸管吸取摇匀的稀释血液,将一小滴血液滴在盖玻片边缘的玻片上,使稀释血液借毛细管现象而自动流入计数室内。如滴入过多,溢出并流入两侧深槽内,使盖玻片浮起,体积改变,会影响计数结果,需用滤纸片把多余的溶液吸出,以深槽内没有溶液为宜。如滴入溶液过少,经多次充液,易造成气泡,应洗净计数室,干燥后重做。红细胞和白细胞的计数,各使用一计数室。
,须静置2-3min,然后在低倍显微镜下计数。计数白细胞时,数四角4 个大方格的白细胞总数;计数红细胞时,数中央大方格的四角的4 个中方格和中央的一个中方格(共5 个中方格)的红细胞总数。计数时应循一定的路径,对横跨刻度上的血细胞,依照“数上不数下,数左不数右”的原则进行计数(图3-5)。计数白细胞时,如发现各大格的白细胞数目相差8 个以上;计数红细胞时,如各中方格的红细胞数目相差20 个以上,表示血细胞分布不均匀,必须把稀释液摇匀后重新计数。
白细胞数:将4 个大方格内数得白细胞总数乘以50,即得每mm3 血内的白细胞总数,因为:
(1) 加入血20mm3(1ml=1cm3=1000mm3,故20mm3=),使血液稀释20 倍,换算成未稀释血时应乘以20。
(2)计数四角上4 个大方格内的白细胞总数,其容积为1×1××4=。换成每mm3 。这样把4 个大方格内