实验六 微生物的大小测定和显微直接计数.ppt

文档介绍：实验六
微生物大小测定和显微直接计数
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一、实验目的
学会测微尺和血球计数板的使用方法。
建立微生物大小的概念。
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二、基本原理

微生物的大小需要用刻有一定刻度的测微尺来测量,先用绝对长度的镜台测微尺来校正不表示绝对长度的目镜测微尺,计算后者每格所代表的实际长度,然后放上待测的标本,用目镜测微尺测定标本上微生物细胞占目镜测微尺的格数,就可计算该微生物的大小。
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(1)目镜测微尺的构造目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确的等分刻度,有等分为50小格和100小格两种。刻度的大小是随使用的接目镜和接物镜的放大倍数而改变,用前必须用镜台测微尺来标定。
(2)镜台测微尺的构造镜台测微尺为一块特制的载玻片,其中央有一小圆圈。圆圈内刻有分度,将长1mm的直线等分为100小格,每小格等于10μm。
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目尺每格长度=
两个重叠刻度间镜尺格数×10/两个重叠刻度间目尺格数
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微生物常用的计数方法有两种,即直接计数法和间接计数法。
前者利用血球计数板在显微镜下直接计数,能立即得到数值,但死活细胞都计数在内。
后者是在平板上长成菌落后再计数,反应较真实,但费时太长。
本实验是利用血球计数板进行直接计数。
计数前需对样品做适当稀释,按照规定方法及计算公式运算后,即可得出实际数值。
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血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面个刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。这一大方格为边长为1mm正方形,,。
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16小格× 25中格计数室
25小格× 16中格计数室
计数室的两种刻度形式
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