文档介绍：篇一:有机实验报告apc药片
薄层层析(tlc)
——apc药片的剖析
实
验
报
告
色谱法的一些基本知识
色谱法的基本原理
色谱法是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能(即分配)的不同,让混合物的溶液流经该物质,经过反复的吸附或分配等作用,从而将各组分分开。固定不动的物质称为固定相,固定相可以是固体吸附剂,也可以是液体(吸附在支持剂上)。
根据组分在固定相中的作用原理不同,可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱等;按操作条件可分为薄层色谱、柱色谱、气相色谱和高压液相色谱等。流动相的极性小于固定相极性时为正相色谱,而流动相的极性大于固定相时为反相色谱。
薄层色谱的原理与应用
波层色谱简称tlc,是一种固—液吸附色谱的形式,与柱色谱的原理和分离过程相似,吸附剂的性质和洗脱剂的相对洗脱能力,在柱色谱中适用的同样适用于tcl中。与柱色谱不同的是,tcl中的流动相沿着薄板上的吸附剂向上移动,而柱色谱中的流动相则沿着吸附剂向下移动。
tlc的最大优点是:简易,快速,灵敏,高效,范围广(定性—定量,~500mg)。
tlc常应用于有机物的鉴定和分离,如通过与已知结构的化合物相比较,可鉴定有机混合物的组成;在有机化学反应中可以用于对反应进行跟踪;在柱色谱分离中,经常用其来确定分离条件和监控分离的过程。tcl不仅可以分离少量样品(几微克),而且也可以分离较大量的样品(可达500毫克),特别适用于挥发性较低,或在高温下易发生变化而不能用气相色谱进行分离的化合物。
在tlc中所用的吸附剂颗粒比柱色谱中用的要小得多,一般为260目以上。当颗粒太大时,表面积小,吸附量少,样品随展开剂移动速度快,斑点扩散较大,分离效果不好;当颗粒太小时,样品随展开剂移动速度慢,斑点不集中,效果也不好。
薄层色谱所用的硅胶有多种:硅胶h不含粘合剂;硅胶g含粘合剂(煅石膏);硅胶gf254含有粘合剂和荧光剂,可在波长254nm紫外光下发出荧光;硅胶hf254只含荧光剂。同样氧化铝也可分为氧化铝g、氧化铝gf254及氧化铝hf254。氧化铝的极性比硅胶大,易用于分离极性小的化合物。
几个常用知识
1).硬板∕软板:加粘合剂的薄板为硬板,不加粘合剂的薄板为软板。
2).样品溶剂要求:溶解性好,沸点尽量低。
3).展开剂的洗脱能力与其极性成正相关:石油醚﹤环己烷…苯﹤乙酸乙酯…﹤甲醇﹤水﹤乙醇。
4).板活性要与其含水量有关,可用标准样品进行实验测得。
5).常用显色方法有:碘熏法、特性反应、uv灯等。
6).比移值rf=(样品组分最高浓度中心距原点距离)∕(展开剂前沿距原点距离)影响rf的因素有粒度、厚度、均匀度、活性、展开剂极性及杂质含量、环境温度等。
7.)在tlc中要特别注意吸附剂的确定、展开剂的选择及薄板的制板技术。
薄层层析---apc药片剖析(实验部分)
【实验目的】
复****回顾色谱的基本知识,加深掌握理解。
加强薄层色谱的原理记忆及其应用
。
3掌握薄层色谱的操作技术。
【实验原理】薄层层析是近年发展起来的一种新的分离、分析方法,它具有简易、快速、灵敏、高效等优点,所以发展十分迅速现已成为一种快速的微量分析技术。apc商品名为复方阿斯匹林,这种最常用的解热镇痛药为样品,对其组分采用薄层层析法和紫外分光光度法进行分离和定量分析,这种测定方法,操作简便,仪器普及,便于推广。
薄层色谱是一种微量而快速的分离方法,它是根据分析试样中各组分在不相混溶并做相对运动的两相—流动相和固定相中的溶解度不同或者固定相上的物理吸附程度的不同,即在两相中的分配不同,而使各组分进行分离。本实验采用标准样法排除干扰。
rf?溶质最高浓度中心至原点中心的距离
溶剂前沿至原点中心的距离
对于一种化合物,当展开条件相同时rf是一个常数。因此可用rf作为定性分析的依据。但是由于影响rf的因素较多, 如展开剂、吸附剂、薄层板的厚度、温度等都可以影响rf的值,因此同一化合物rf值与文献提供的数值相差较大。在实验中常采用的方法是,在一块板上同时点一个已知物和一个未知物,进行展开,通过计算rf值来确定是否为同一物质。
【实验仪器及试剂】
载玻片(5块) 干燥器烘箱电子天平 uv灯吹风机分液漏斗锥形瓶(250ml) 玻璃棒烧杯(100ml) 广口瓶毛细管量筒(10ml) 镊子铅笔尺子表面皿
硅胶gf254 羧***纤维素钠(cmc) apc药片1片 ch2cl2 无水mgso4 展开剂:苯:***:冰醋酸:甲醇=120:60:80:1 水
【实验步骤】
1)玻璃板的选择与清洗选取平整、光滑、透明度好的平板玻璃,先用去污粉洗净,然后依次用自来水、蒸馏水洗净,凉干。每组5块玻璃板。
2)调浆铺板称取gf