项目四 PCR扩增目的基因---大肠杆菌丝氨酸羟甲基转移酶基因(glyA) PPT幻灯片.ppt

文档介绍：基因操作技术
第三章 PCR技术
聚合酶链式反应(po;ymerase chain reaction ,PCR)
提纲
一、PCR技术简史
二、PCR的基本原理
三、PCR的反应条件
四、PCR的类型和应用
五. PCR引物设计及相关软件使用
TAGC
5’
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
解旋酶
解链酶
DNA
解旋解链
合成引物
子链延长
一、PCR技术简史
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反应的发明
TAGC
5’
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
DNA
解旋解链
合成引物
子链延长
GGAUCG
5‘
AUCGCG
5‘
引物酶
引物酶
RNA引物
RNA引物
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反应的发明
一、PCR技术简史
1985年,美国PE-Cetus公司的Mullis等人发明了聚合酶链反应(PCR)
基本原理是在试管中模拟细胞内的DNA复制
最初采用E-coli DNA 聚合酶进行PCR,由于该酶不耐热,使这一过程耗时,费力,且易出错
耐热DNA聚合酶的应用使得PCR能高效率的进行,随后PE-Cetus公司推出了第一台PCR自动化热循环仪
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反应的发明
一、PCR技术简史
Kary B. Mullis
<<The Unusual Origin
of the Polymerase Chain Reaction>>
1989年美国《Science》杂志列PCR 为十余项重大科学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年,Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖。
生物样品
DN***段
基因诊断
基因治疗
基因工程产品
法医学检测
人类学研究
……
基因组DNA
获取特定DN***段
扩增特定DN***段