文档介绍：中国医科大学
硕士学位论文
慢性应激抑郁型小鼠黄褐斑实验动物模型的研究
姓名:申宇鸿
申请学位级别:硕士
专业:皮肤病与性病学
指导教师:耿龙
20090301
德国鷐慢性应激抑郁型小鼠黄褐斑实验动物模型的研究材料与方法目的一、材料·中文论著摘要·⒍⑹笛橐┢泛褪约⑹笛槠鞑刖黄褐斑的病因复杂,主要致病因素有紫外线照射、内分泌失调、情绪变化等。长期紫外线照射可使黑色素细胞增殖,而黑素的生成是酪氨酸酶一系列氧化反应并使体内氧化与抗氧化过程出现异常,如过氧化脂质摺下降等,所以可以通过皮肤黑色素病理形态学,难苌颩及康谋浠芯炕褐斑实验动物模型。本课题采用慢性应激刺激法致小鼠出现抑郁症状,用雌激素铺逋全身攻击小鼠,并同时对其进行局部照射紫外线来建立黄褐斑实验动物模型进行探讨,并与其他小鼠黄褐斑实验动物模型进行对照研究。通过给小鼠进行紫外线照射局部、注射黄体酮和慢性应激抑郁刺激法综合作用,建立慢性应激抑郁型小鼠黄褐斑实验动物模型,并与紫外线照射动物模型建健康雌性/∈螅褰嗉军事医学科学院实验动物中心提供黄体酮注射液/,超氧化物歧化酶约梁小⒈试剂盒暇┙ǔ缮锕こ萄芯克,蟮タ寺】固英国。Ⅳ吣茏贤夤庵瘟埔;队喙δ苷彩色病理图像分析系统型站芤皆河氡本┖娇蘸教齑笱Ч餐兄频。旨立的方法对比观察。
二、方法动物分组实验分组抑郁模型测定癝活性测定皮肤黑色素细胞的病理形态学观察取小鼠只,随机分为椋赫W只、紫外线组只、慢性应激抑郁组只。造模时间,第一批小鼠实验进行天,第二批小鼠实验进行天。⒄W椋好恐芡衙~危刻旒∪庾⑸渥⑸溆盟/体质量,连续天观察小鼠的脱毛部位皮肤变化情况。⒆贤庀咦椋合韧üな笛榈玫紹痗小鼠皮肤长波紫外线。珹钚」舛玖为痬胁ㄗ贤庀8菰な笛榈贸稣丈浞椒ǎ天以咳照丈湟淮危丈天,第煨∈笃し舫鱿智嵛⒔⒙杂ひ钟糇椋喊凑站湟钟裟P图右愿慕矸椒ǎ鹤贤庀哒丈浞椒同紫外线组。每日肌肉注射%黄体酮痥逯柿浚谝慌∈罅臁5⒖醭∈笛⑹笛榭J冀崾毙∈筇逯柿体重浠⒁禾逑氖匝同时取肝脏及脱毛部位皮肤,用预冷生理盐水℃逑矗≡又剩酶桑腥皮肤⒏卧.,分别放入有队谧橹榈脑だ渖硌嗡男∈怨苣冢ḿ羲的组织倒入玻璃均浆管中,上下转动研磨危浞盅兴椋棺橹均浆后以痳胄分钟,取上清液采用试剂盒检测活性。第一批小鼠当脱毛部位皮肤出现明显的色变丈,取去毛皮肤小红斑量/停止照射欤坏天、第天以丈湟淮危臁⒌煲二批小鼠在停止全部刺激后一周处死。
;士表示,进行方差分析,凇验。一、抑郁模型二、癝的水平脏屑灾圆钜靝姐口矽。提示这种模型建立法对于小鼠皮肤、肝脏三、皮肤黑色素细胞的病理形态学结果黑色素阳性目标用计算机进行图象分析统计学分析小鼠表皮黑色素沉着数量小鼠表皮黑色素沉着深浅度ジ6砹止潭ǎ9媸袂衅T倬牙了⒖乖薷春螅素复染。用嬉豢棺鲆跣远哉铡5诙∈笤谑笛旌蟠λ廊∑ぃ每张切片在显微镜物镜拢婊≡个视野进行彩色图像采集与存储,计算出每个视野的形态学阳性目标心勘中的数密度、光密度参数的总和平均数,各组间参数的标准差皇縎⒈曜嘉蟆⒈湟煜凳在橹校贤庀咦椤⒙杂ひ钟糇榱街帜P托∈蟾卧嘤肫し舻腗水平均较正常组升高,钚越险W橛兴陆怠F渲校杂ひ钟糇熳樾∈笃し应用免疫组织化学法,用5谝豢固澹庖咦榛椒ǎ珼显色,苏木病理步骤同上。黄体酮贤庀慢性应激抑郁组小鼠的穿格次数、直立次数、理毛次数均较正常组有所减少,并有显著差异。体重增加最少,糖水消耗显著低于正常组琍提示慢性应激刺激天后的小鼠出现了抑郁的征象。臣蒲Т碛屑灾圆钜傀口砂,慢性应激抑郁组天组小鼠皮肤、肝幕钚杂跋旆浅4蟆模型组小鼠皮肤黑素细胞的个数均较正常组有所增加,其中慢性应激抑郁天组有显著性差异。模型组数密度明显高于正常组,尤其是慢性应激抑郁模型天组可见与正常组有显著差异。
结论关键词模型组小鼠皮肤黑色素阳性目标的平均光密度明显高于正常组,统计学有显本实验结果显示慢性应激抑郁型小鼠黄褐斑模型组黑色素着色面积、黑色素细胞数量明显大于正常组,黑色素着色深度明显增加,经统计学分析后有显著性差化学改变特征,具备黄褐斑的主要临床特征。本实验优点在于方便计算紫外线照射量,照射部位及取材部位固定,抑郁模型建立方法经典,可产生明显抑郁症状,且小鼠死亡率低,模型易于重复建立,较适合用作黄褐斑动物模型的研究。黄褐斑;抑郁型小鼠;实验动物模型著性差异。异。小鼠皮肤和肝脏的棵飨陨撸琒含量明显降低,符合黄褐斑的生物:口’己
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