文档介绍：Ca2+对蟾蜍坐骨神经
—腓肠肌收缩的影响
主讲人:何玉芳
小组成员:何玉芳马文艳
李志云邵立杰
选题的意义
实验目的
实验原理
实验材料与方法
创新点
可行性分析
实验设计
选题的意义
骨骼肌的收缩能力是影响躯体运动的重要因素。通过骨骼肌的收缩能力对骨骼肌疲劳机制的研究一直是运动生理学研究领域的热点之一。本实验通过改变离体坐骨神经腓肠肌标本的外环境中的钙离子浓度,来研究不同钙浓度对肌肉收缩的影响,旨在为运动训练方法的改进提供基础数据和理论依据。
实验目的
1)观察不同Ca2+浓度对坐骨神经腓肠肌标本收缩能力的影响,阈强度和最适刺激强度的影响,以及最适刺激强度下单收缩的时程。
2)进行 Ca2+影响蟾蜍坐骨神经-腓肠肌收缩的部位的初步研究
实验原理
在神经肌肉接头处,神经冲动激活神经末梢细胞膜上的钙离子通道引起钙离子内流浓度升高,引起囊泡与突触前膜融合并破裂,释放神经递质。
肌肉兴奋引起肌浆内钙离子的升高,钙离子和TnC结合并减弱了TnI和肌动蛋白的结合力,使原肌球蛋白移位暴露肌动蛋白与肌球蛋白的结合位点。
通过改变离体神经肌肉标本的外环境中的钙离子浓度,来研究不同钙浓度对肌肉收缩的影响。
实验材料与方法
实验动物
两只体型大小相似的蟾蜍
实验器材
常用手术器械,RM6240多道生理信号采集系统,张力传感器,硅板,培养皿,纱布,小烧杯,胶头滴管,移液管,粗棉线,任氏液配方等。
实验试剂
不同Ca2+浓度任氏液
任氏液浓度的配制
把Ca2+加入到任氏液中配置成Ca2+浓度为0 g/L、 (标准)、 g/L、12 g/L 的Ca2+——任氏液。
制备蟾蜍坐骨神经——腓肠肌标本
按常规方法用生长状况良好的成体蟾蛛制备坐骨神经排肠肌标本, 并在肌肉端和神经端分别结扎一根棉线备用, 在任氏液中稳定5min。每组均用标准任氏液作为对照后再分别浸泡到Ca2+浓度为0 g/L 、 g/L、12 g/L任氏液溶液浸润5min。
将坐骨神经膝肠肌标本的股骨插入神经屏蔽盒的股骨孔中, 用螺丝固定紧, 坐骨神经搭在刺激电极上, 上面覆盖浸有石蜡的脱脂棉, 防止神经干燥另一端排肠肌的棉线连张力换能器, 张力换能器固定在万能支架上, 以保证与其连接的棉线的张力基本一致。任氏液使用滴管滴加使腓肠肌始终保持湿润。刺激由RM6240生理信号记录仪系统输出, 张力换能器的信号输入RM6240生理信号记录仪,启动RM6240生理信号记录仪。
仪器连接
刺激参数的设置
      阈强度的测定起始刺激:; 增量:; 刺激时间间隔:20mS;  组间延时:4S;  波宽:1mS
      最适刺激强度的测定:起始刺激:阈强度;增量:; 刺激时间间隔:20mS;  组间延时:4S;  波宽:1mS
记录阈强度和最适刺激强度
     由RM6240生理信号记录仪自动输出刺激, 记录阈强度和最适刺激强度。
创新点
在现行的实验教材中是将离体的神经—肌肉标本用标准任氏液湿润,保持其活性,测定肌肉的收缩能力随刺激强度和刺激频率的改变而发生的变化状况,但是Ca2+浓度对肌肉收缩的影响并没有提及,本实验将对此进行探究,旨在为有关这方面的研究提供基础数据。