文档介绍：薄层层析与柱层析 ——问题探讨 黄松
薄层层析:
固定相:硅胶(G,F)、氧化铝、纤维素、聚酰***、硅藻土、葡聚糖凝胶。
粘合剂:CMC—Na等。
添加剂:荧光指示剂、酸碱等。
点样量:1~5μl(过多或太少)
斑点大小:5mm左右(大小)
点样
方式:线性(上行、下行、水平等)、环形、多次等。
影响因素:相对湿度(如何控制)、温度、溶剂蒸气(是否饱和)、展距等。
展开
展开剂:
溶剂的分类
溶剂一般分为6类:
第Ⅰ类为电子授受体溶剂:甲苯、苯、四氢呋喃、乙酸乙酯、***、乙睛。
第Ⅱ类为质子给予体溶剂:异丙醇、正丁醇、无水乙醇、甲醇。
第Ⅲ类为强质子给予体溶剂:***仿、冰醋酸、甲酸、水。
第Ⅳ类为质子受体溶剂:三乙***、***。
第Ⅴ类为偶极作用力溶剂:1,2-二***乙烷、二***甲烷。
第Ⅵ类为惰性溶剂(非极性溶剂):环己烷、正己烷、四***化碳。
展开剂的选择一般可以从电子授受体溶剂(Ⅰ)、质子授受体溶剂(Ⅱ、Ⅳ)、偶极作用力溶剂(Ⅴ)及溶剂极性调节溶剂(Ⅲ、Ⅵ)中分别选出一种构成四元系统。
展开剂中溶剂的作用
①展开剂中比例较大的溶剂极性相对较小,起溶解物质和基本分离的作用,一般称为底剂。
②展开剂中比例较小的溶剂,极性较大,对被分离的物质有较强的洗脱力,帮助化合物在薄层上移动,可以增大Rf值,但不能提高分辨率,称为极性调节剂。
③展开剂中少量酸、碱,可抑制某些酸、碱性物质或盐类的解离而产生斑点拖尾,故称之为拖尾抑制剂。
④展开剂中加入***等中等极性溶剂,可促使不相混合的溶剂混溶,并可以降低展开剂的粘性,加快展速。
选择展开剂的方法
选择展开剂的原则为“相似相溶”原则