文档介绍：实验十一还原糖含量的测定
还原糖是指具有还原性的糖类,葡萄糖、果糖、麦芽糖和乳糖等均为还原糖。还原糖的测定方法很多,其中最常见的方法有直接滴定法、高锰酸钾滴定法和铁***化钾滴定法。本实验采用铁***化钾滴定法测定还原糖的含量。
实验目的和要求
了解铁***化钾滴定法测定还原糖的基本原理。
掌握铁***化钾测定糖的操作及应用。
实验基本原理
在碱性介质中,一定量过量的铁***化钾可将还原糖氧化为酸类物质,而铁***化钾被还原成亚铁***化钾,反应体系中剩余的铁***化钾可用碘量法进行测定。反应如下:
6K3 )6 +C6 H12O6 +6KOH → 6K 4 )6 +(CHOH) 4 ·(COOH)2 +4H2 O
葡萄糖葡萄糖二酸
2K3 )6 +2KI →2K 4 )6 +I2
I2 +2Na2 S2 O3 →2NaI+Na2 S 4 O 6
为避免第一步反应中生成的亚铁***化钾对后面反应的干扰,可以加入硫酸锌使之生成配合物沉淀,反应如下:
)+3ZnSO4 → K2Zn3[)6]2↓+3K2SO4
白色沉淀
仪器和试剂
主要仪器
移液管(10ml、5ml、2ml)、量筒(50ml、25ml、10ml)、微量滴定管(5ml、10ml、)、锥形瓶(10ml、150ml)、水浴锅。
试剂
95%乙醇溶液、%淀粉溶液、酸性缓冲溶液、、12%钨酸钠溶液、%铁***化钾溶液、乙酸盐溶液、10%碘化钾溶液。
实验步骤
样品液制备
(过40目筛)置于100ml锥形瓶中,将锥形瓶倾斜以使全部样品集中瓶底一侧,并用95%乙醇5ml润湿,再加入50ml酸性缓冲溶液,振荡使成悬浮液。立即加入2ml 12%钨酸钠溶液,振荡5min,立刻过滤,弃去最初的8~10滴,剩余的为还原糖提取液,收集于干燥洁净的锥形瓶中。
还原糖的测定
准确吸取5ml提取液放入100ml锥形瓶中,加入10ml ***化钾溶液,混匀,在沸水浴中准确加热20min,然后立即在流水中冷却,加入25ml乙酸盐溶液和碘化钾溶液,混匀,,%淀粉溶液1ml,继续滴定至蓝色完全消失为止。记录用去的硫代硫酸钠溶液的体积(V1)。
用5ml蒸馏水代替样品提取液做空白实验,记录用去硫代硫酸钠溶液的体积(V2)。
样品和空白实验均需做2~3份平行实验。
结果处理
先求氧化还原糖所用的硫代硫酸钠溶液的体积V(ml)。
V=(V 2-V1 )K
式中
K——。
按V值查本实验表6,找出试样中所含还原糖的百分数。若在两数之间,可按插入法求得。
表6 ***化钾溶液用量与还原糖含量数据对照表
六、说明
1、本实验结果不是根据测定时所用反应式及试剂的用量直