文档介绍：安徽医科大学
硕士学位论文
高效毛细管电泳法分析氨甲蝶呤及其应用
姓名:何晓东
申请学位级别:硕士
专业:临床检验诊断学
指导教师:沈佐君
20050501
中英文对照羟丙基一换泛叶酰聚谷氨酸合成酶毛细管区带电泳氨甲蝶呤环糊精电渗流二极管阵列检测器对映体手性离效毛细管电泳狟—安徽医科大学硕士学位论文—狢猟】
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中文摘要两种对映体抗肿瘤效应进行研究。实验供分为三部分。第一部分血清中氨甲蝶岭定量检测方法建立及应用第二部分氨甲蝶呤对映体拆分方法建立及应用药物的分离是一件有挑战意义的工作。对映体必须在手性环境才能被分离,毛细高效毛细管电泳技术,相对于大家熟知的高效液相、气相色谱而苦,是一种新的分离技术,它能够分离各种分子量的物质,甚至包括大分子蛋白质。分离前,将毛细管末端浸入样品瓶,在外加气压力、真空或电压作用下样品进入单的一种分离模式就是毛细管区带电泳C腹芮缬镜谋局侍氐闶钦个毛细管内充盈的电泳缓冲液为均质且电场强度相同,待测物根据荷质比不同而氨甲蝶呤潜臼笛榈闹饕Q芯慷韵螅魑?挂端岽灰┪锏拇在临床广泛应用,自然界中存在秃虳型两种对映体形式。本论文报道用高效毛细管电泳技术建立氨甲蝶岭定量和其手性对映体拆分方案,并以此为平台对这首先,在实验中综合考虑了缓冲液、值和毛细管温度温度和样品处理等多种影响分离的因素,最终在方案中选用直径艹行Сざ未包被的磊英毛细管,以,浓度牧姿嵫挝5缬净撼逡海焖波长为,在电压下,结果某龇迨奔湓趌种幽凇J笛橹卸愿梅桨附行了评价:本方案的线性范围为疞—.疞,最低检出浓度为疞,在—。由于对映体所具有的物理和化学性质相同,所以具有非对称手性碳的对映体管电泳技术由于能将溶液中的手性试剂可以通过用简单的加压方法导入毛缅管管内,然后待测物在高电场作用下根据其电荷量、分子大小和疏水性被分离丌。依据选用毛细管类型和电解质缓冲液的不同电泳可分为几种分离模式,其中最简被分离。安徽医科大学硕士学位论文
糊精的浓度、缓冲液的浓度、值、电泳温度和改性荆浓度等分离条件进行优化。的磷酸盐缓冲液,在的分离电压,毛细管温度℃,可馒氨甲蝶呤对映体第三部分中远杂程蹇怪琢鱿赴锘钚圆钜煅芯用高效毛细管电泳技术检测药物作用后上溃液中杂程宓牟辛袅俊=峁⑾细胞对两种对映体的吸收没有差别;.韵赴囊种菩Ч飨陨逃总之,、运行成本低且样品消耗少等许多优势。。我们在实验中发现石英管内表面和带高电荷的物质间的吸附是电泳过程中的主要问题,因为这直接影响到实验分离的效率和实验本实验用毛细管区带电泳技术,以中性环湖精为氨甲蝶呤拆分选择剂,对环在分钟内达到基线分离,分离度为蝶呤手性对映体相对其它方案中具有简单、快速、经济的特点,它可用于药品制剂纯度和质量检测工作。通过体外模拟静脉给药方式,。细胞在含不同浓度药物的培养液中作用小时后,用苔盼兰染色法观察杂程宥訟伟┲,抻制效果反而降低。据此认为对映体在细胞株中有不同的生物活性;在特别离浓度条件下,细胞对药物的敏感性并不是浓度依赖性,提示可能存在负反馈作用。实验结果表明在临床用药中要考虑到对映体的生物活性差异,控制用药剂量。作为一种新兴、快速有效的分析方法将会得到快速发展。的重复性。另外,本技术由于进样体积少ǔV挥衛~瓜喽约斐鱿藿系停现在通过对样品进行前处理和用激光检测器使检出限提高丁氮甲蝶呤:高效毛细管电泳:手性;抗肿瘤效应内,所以它为构建手性环境提供了理想的技术平台。结果用含/聂潜一环糊精,%的异丙醇,/琾。总之高效毛细管区带电泳法拆分氨甲总结化学分析中,关键词对映体:安徽医科大学硕士学位论文
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