文档介绍：硫酸铵微生物限度检查的
方法验证
:
建立硫酸铵的微生物限度检查方法,确认该方法适合于该药品的细菌、霉菌、酵母菌测定及控制菌的检查。
配制方法:取本品 g,加1L蒸馏水,加热溶解,分装,121℃,30min灭菌,备用。
配制方法:取本品 g,加1L蒸馏水,加热溶解,分装,121℃,30min灭菌,备用。
配制方法:取本品 g,加1L蒸馏水,加热溶解,分装,121℃,30min灭菌,备用。
MUG培养基
配制方法:取本品 g,加1L蒸馏水,加热溶解,分装,121℃,30min灭菌,备用。
:
(B)26 003 第 3 代来源:江苏省药品检验所
(B)44 102 第 3 代来源:江苏省药品检验所
(B)63 501 第 3 代来源:江苏省药品检验所
白色念珠菌(F)98 001 第 3 代来源:江苏省药品检验所
黑曲霉(F)98 003 第 3 代来源:江苏省药品检验所
:
、大肠埃希菌、枯草牙孢杆菌的新鲜培养物少许接种至营养肉汤培养基中,30-35℃培养 24 小时;
,23-28℃培养 48 小时;
,23-28℃培养 5 天。
-35℃培养 24 小时的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草牙孢杆菌营养肉汤培养物1ml,%***化钠溶液,10倍稀释至约 10-5~10-6 ,备用。
-28℃培养 48 小时的白色念珠菌改良马丁培养基培养物1ml,%***化钠溶液,10倍稀释至约
10-5 ,备用。
-28℃培养 5 天的黑曲霉改良马丁琼脂培养基斜面培养物,%(ml/ml)%***化钠溶液,洗脱孢子,吸出并转移至空试管作为原液,%(ml/ml)%***化钠溶液9ml,10倍稀释至 10-4 ,混匀备用。
、霉菌及酵母菌计数方法验证(平皿计数法)
验证试验至少应进行三次独立的平行实验,并分别计算各试验菌每次试验的回收率。
取试验可能用的最低稀释级供试液1ml和50~100cfu试验菌,分别注入平皿中,立即倾注琼脂培养基,每株试验菌平行制备2个平皿,按平皿法测定其菌数。
测定所加入的试验菌菌数。
取规定量供试液,按菌落计数方法测定供试品本底菌数。
若供试品制备需要分散、乳化、中和、离心或薄膜过滤等特殊处理时,应增加稀释剂对照组,以考察供试液制备过程中微生物受影响的程度。试验时,可用相应的稀释液替代供试品,加入试验菌,使最终菌浓度为每1ml供试液含50~100cfu,按试验组的供试液制备方法和菌落计数方法测定其菌数。
试验组的菌回收率(%)=
试验组平均菌落数-供试品对照组平均菌落数
×100%
菌液组平均菌落数