文档介绍：液相色谱常见问题及处理方法
HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法
1、样品量不足,解决办法为增加样品量
2、样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子
3、样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器
4、检测器衰减太多。调整衰减即可。
5、检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数
6、检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。
7、检测池中有气泡。解决办法为排气。
8、流动相流量不合适。调整流速即可。
为什么HPLC柱柱压过高
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。
1、拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查(在安装了保护预柱的情况下);
2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,若压力仍高则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;
3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;
4、更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商联系。
液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?
1、筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。
2、存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子
如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化
漂移现象
1、温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定
2、流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等
3、柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡
快速变化现象
1. 流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定
2、泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。
3、流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
HPLC 仪器问题
1、我的HPLC泵压明显的偏高,请问可能的原因?
答:流速设定过高;流动相或进样中有机械杂质,造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞;流动相粘度过大;柱温过低;缓冲盐结晶;压力传感器故障。
2、基线不稳,上下波动或漂移的原因是什么,如何解决?
答:;用超声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气
;取下单向阀,用超声波在纯水中超20分钟左右,去处堵塞物
,造成压力波动;更换泵密封
;确定漏液位置并维修
;流通池出液口加负压调整器
;将波长调整至最大吸收波长处
,特别是流动相发生变化时;用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
3、接头处为何经常漏液,如何处理?
答:接头没有拧紧;拧松后再紧,手紧接头以手劲为限,不要使用工具,不锈钢接头先用手拧紧,再用专用扳手紧1/4-1/2圈,注意接头中的管路一定要通到底,否则会留下死体积。接头被污染或磨损;建议更换接头。接头不匹配,建议使用同一品牌的配件。
4、进样阀漏液是如何造成的?
答: