文档介绍：豆浆中还原糖含量的测定
葡萄糖分子中航油游离醛基,果糖分子中含有游离***基,乳糖和麦芽糖分子中含有游离的半缩醛羟基,因此它们具有还原性,是还原糖。其他非还原糖,如常见的蔗糖、糊精淀粉等,它们本身不具有还原性,但可以通过水解反应成具有还原性的单糖,再进行测定,然后换算成样品中的相应的糖类的含量。所以还原糖的测定为糖类的测定的基础。
测豆浆中还原糖含量的两种方法有3,5-二硝基水杨酸法操作简便,快速,杂质干扰较少;费林试剂法操作复杂,易受人为、主观因素影响,可靠性差。故测定豆浆中还原糖应以水杨酸法较为适合。
实验原理
3, 5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量。
试剂与仪器
①3,5-二硝基水杨酸试剂(又称DNS试剂):
甲液: 1O%氢氧化钠中,并稀释至69mL,。
乙液:称取255g酒石酸钠,加到300 mL 10%氢氧化钠中,再加入880 mL 1%3,5-二硝基水杨酸溶液。
将甲液与乙液相混合即得黄色试剂,贮于棕色试剂瓶中。在室温下,放置7—10天以后使用。
②葡萄糖标准液:准确称取干燥至恒重的分析纯葡萄糖100mg,加少量蒸馏水溶解后,以蒸馏水定容至100mL即含葡萄糖为1. 0mg/ml冰箱保存备用。
③乙酸锌溶液:称取21. 9g乙酸锌, 加3ml冰乙酸并稀释至1000ml。
④106g/L亚铁***化钾溶液:***化钾,溶于水中,稀释至100ml。
⑤过滤装置
⑥电热恒温水浴
⑦721分光光度计
实验步骤
葡萄糖标准曲线制作
取葡萄糖标准溶液( 1mg/ml) 0-, 均用蒸馏水稀释至1ml,加入1mlDNS试剂, 在沸水浴中加热5min, 取出
以自来水冷却, 再加入蒸馏水8mL混匀, 在波长520nm下, 以1cm比色杯测定各管光密度(空白管溶液调零),以葡萄糖含量(mg)为横坐标, 相应各管光密度值为纵坐标绘制标准曲线。
样品的预处理
取豆浆30ml置于100ml容量瓶中, 边摇边慢慢加入5ml乙酸锌和5ml亚铁***化钾溶液, 加水至刻