文档介绍：复旦大学
博士学位论文
Cyclin D3与elF3k的相互作用及TH1与A-Raf相互作用的研究
姓名:沈晓云
申请学位级别:博士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:顾建新
20040501
导了一个/诘腃—,也能特异地与表达,从而使细胞产生增殖、分化、凋亡等生命活动。与真核翻译起始因子膒亚基南嗷プ饔及階相互作用的研究在细胞周期的调控过程中,有两大家族的蛋白发挥着重要的作用。一个家族是橇姿峄匾斓牡鞍桌吹鹘谙掠瓮贰A硪桓黾易迨亲诺牡鹘诘白怯隒分子结合来调节募っ富钚浴5毕赴泳仓蛊诮胂胞分裂时,编码蚦幕蛟贕诒患せ睿琧成一个复合物,活化后的激酶复合物磷酸化底物蛋白调控下游的通路。细胞周期进程,还与细胞生长、细胞分化、转录调节和凋亡有关。我们实验室报在/谙嗷プ饔谩N了进一一步了解为诱饵蛋白,用酵母双杂交技术筛选人胎肝文库,找到了与与南嗷プ饔檬翘匾煨缘模蛭N颐南嗷プ饔谩N颐枪菇═的缺失突变与月互结合所需的区域位于的第氨基酸之间,这一区域是们进一步用体外结合实验、体内的免疫共沉淀和激光共聚焦确定了南嗷プ饔谩<す夤簿劢瓜晕⒕倒鄄旆⑾謊分布于细胞质和细胞核中,与谙赴诓唤鼍哂泄捕ㄎ唬夜泶颿存细胞中的分布,使更多的鞍准性谙赴酥小9泶飁会抑制细胞影响。这为我们进一步理解的线索。细胞通过信号传导通路将来自细胞外各种刺激传导入细胞核内,调节基因的ǖ纪肥窍赴瓿筛髦稚疃罨镜男藕畔统之一。其基本组成是一个三级激酶级联反应,包括,和/疢/肥瞧渲凶罨尽⒀芯孔疃嗟男藕磐贰调控。易逵腥鲆旃固澹篈,絀猂一。它们在结构上很保守,但越来越多的实验表明,它们在功能上并不是冗余的,而是各有其特异的摘要嬷隒駽校琧不仅作为一个和的调节亚基在期调节在细胞里的功能,我们以结合的蛋白真核翻译起始因子膒亚基没有检测到肫渌點体,用酵母双杂交的方法明确了葱宰畹偷牟课弧N会影騟的翻译活性,而过表达则会增强细胞的翻译活性,同时转录水平不受和谙赴锌赡艿牡墓δ芴峁┝擞幸这‘传导通路主要与控制细胞生长有关,包括对细胞增精、转化、分化及凋亡的在和,’
在我们实验室以前的的工作中,采用酵母双杂交的方法,以S斩。昕寺〉囊桓鲂禄颍杂谒墓δ芊矫婊姑挥醒芯俊1白筛选了人胎肝文库,发现了一个与猂相互作用的蛋白实验中对階的相互作用进行了进一步的研究。在穌验中验证了階的相互作用,并通过酵母共转化和镜观察也证实了階在细胞内的共定位。我们的实验还表明階的相互作用是特异性的,因为’隦家族的另两个成员猂和荒于细胞质和细胞膜上,而通过对鞍捉峁褂蚍治觯颐欠⑾制渌坪醪痪哂屑酶结构域,推测有可能是一种新的构架蛋白。这些研究有助于对虯作用的功能和机制有进一步的认识和理解。关键词:生物学活性。穌⑾鞍譔端卜被岬那蚨杂谡庵纸岷鲜侵凉刂匾5摹<す夤簿劢瓜晕相互作用。另外,激光共聚焦结果显示,虯的相互作用并不仅仅局限/肫鹗迹疶/猂
胊//.瑂,甇琣,猦¨..琞琣.——,琲
,。甊/疢/—疉—/痶篗/疉—猵甌縫,,瑃琩甅:珺—.琤瑃,瑃,.甌痵縰猟甌甀—甌’猰猂猻猦痵甌琧,
的基因敲除小鼠比较小,且在成熟的雌性小鼠中缺少正常的与真核翻译起始因子膒亚基当绌胞从静止期进入细胞分裂时,编码蚦幕蛟贕诒患せ睿嬷隒駽纬梢桓龈春衔铮罨蟮募っ父春衔锪姿峄物蛋白调控下游的通路—。其中,牧姿峄鹌涔δ艿氖Щ睿市硐胞通过晚期的限制点而进入。蚦谋泶锖艽蟪潭壬弦览涤细胞外信号和信号级联途径,因此,蚦在丝裂原、营养刺激和细胞周是最先被鉴定出来的,随之也被发现S隿乳腺发育并伴有视网膜病,的基因敲除小鼠因缺少卵巢粒层细胞发育而导致不育,至今尚未有成功获得在细胞中发挥着不可替代的重要作用。目前,很多的研究集中于与和结合,磷酸化,参与细胞周期期的调控的功能。本实验室的研究发现,细胞周期穝期的调控外,还可与/诘募っ窩南赴ㄎ唬岣逤不仅参与细胞周期调控,还与细胞的生长有关。叭,可以抑制在粒细胞克隆刺激因子诱导下的骨髓细胞向嗜中性粒细胞的分化,这意味着还可与一些蛋白质相互作用,且这种作用是不依赖于幕可与雌激素受体形成一个复合物,并能不依赖和配体提高雌激素受体介也能与视黄酸类受体ㄊ踊扑崾芴錜和视黄芴錜嗷プ饔茫鹘谟惺踊扑峤岷系鞍住Т嬖诘氖踊扑崂嗍芴的活性。通过直接的结合,有可能在转录活性的调节中起着能激活赴芴逵盏嫉牡蛲獗砻鱟相互作用的研究期机器之间建立了一个基础的联系在蚦洌琧和相比,目前对于的研究还比较少。的基因敲除小鼠的报导。因此除了参与”贕疢期相互作用,且的过表达可以影响磷酸化的活性,而降低”姿峄疊—幕钚事实上,可以调节细胞分化。另外,性的。可以与不同的转录因子相互作用。和导的转录活性。与的作用可抑制的生氏限制的能力。这些研究都显示重要的作用。另外,,”月
其它的翻译起始